临床生化干扰实验批准指南.ppt

1临床生化干扰实验批准指南临床生化干扰实验批准指南 (EP7-A)(EP7-A)2目目 的的 为临床生化检验结果中研究、为临床生化检验结果中研究、鉴别和确定干扰物质效应提供背景鉴别和确定干扰物质效应提供背景信息、指导和实验程序信息、指导和实验程序 专门为专门为厂商厂商和和临床实验室临床实验室制订制订 3作作 用用 对对厂商厂商来说，通过来说，通过EP7EP7程序可以筛选潜在干扰程序可以筛选潜在干扰物质，量化干扰效应，证实病人样本中的干扰，物质，量化干扰效应，证实病人样本中的干扰，确认分析方法对干扰物质的敏感性，评估确认分析方法对干扰物质的敏感性，评估潜在的风险，并将有意义的干扰声明提供潜在的风险，并将有意义的干扰声明提供给用户。给用户。对于对于临床实验室临床实验室来说，来说，通过通过EP7EP7的调查策略，的调查策略，规定数据收集和分析要求，规定数据收集和分析要求，确认干扰声明，研究确认干扰声明，研究明确的干扰物质带来的结果差异，确保分析方法明确的干扰物质带来的结果差异，确保分析方法符合临床要求符合临床要求 。4主要内容主要内容n干扰相关概念与理论干扰相关概念与理论n适用范围适用范围 n干扰实验的判断标准干扰实验的判断标准 n干扰分析前的质量保证干扰分析前的质量保证 n干扰测定干扰测定n用病人标本评价干扰用病人标本评价干扰 n建立、确认和验证干扰声明建立、确认和验证干扰声明 n调查分析与临床不一致的病人结果调查分析与临床不一致的病人结果 5术术 语语分析物分析物(Analyte)(Analyte)：实验室测试的物质或者成分：实验室测试的物质或者成分 干扰物（干扰物（Interferent)Interferent)：样本中不同于分析物并能：样本中不同于分析物并能引起测量偏倚的成分引起测量偏倚的成分 干扰：在临床生化中，由于另一成分影响或样本干扰：在临床生化中，由于另一成分影响或样本的特性，待测一定浓度的被分析物出现有临床意的特性，待测一定浓度的被分析物出现有临床意义的偏倚义的偏倚 干扰标准：干扰物所允许的最大结果偏倚干扰标准：干扰物所允许的最大结果偏倚干扰敏感度：某一分析方法对来自其他成分或者干扰敏感度：某一分析方法对来自其他成分或者样本特性的干扰引起误差的敏感性样本特性的干扰引起误差的敏感性 6术术 语语干扰声明：一种物质影响分析方法结果效应的陈干扰声明：一种物质影响分析方法结果效应的陈述述干扰筛选：分析系统评价中，利用高浓度样品进干扰筛选：分析系统评价中，利用高浓度样品进行一系列能鉴别有可能发生干扰的物质行一系列能鉴别有可能发生干扰的物质差异结果差异结果/异常结果异常结果/假性结果（假性结果（Discrepant Discrepant result/Anomalous results/Spurious results)result/Anomalous results/Spurious results)：一：一种与临床不一致的结果，或同一标本的另一个不种与临床不一致的结果，或同一标本的另一个不同结果，或与其他方法不同结果，或与已确定的同结果，或与其他方法不同结果，或与已确定的临床诊断不相符的结果临床诊断不相符的结果7 术术 语语内源性干扰：样本中的一些生理物质（例内源性干扰：样本中的一些生理物质（例如胆红素、血红蛋白），可对另一些物质如胆红素、血红蛋白），可对另一些物质分析时引起干扰。分析时引起干扰。外源性干扰：一种源自体外的物质（例如，外源性干扰：一种源自体外的物质（例如，药物或其代谢物，防腐剂，污染物），可药物或其代谢物，防腐剂，污染物），可对样本中另一物质的分析引起干扰。对样本中另一物质的分析引起干扰。8术术 语语验证（验证（validationvalidation）：通过调查及提供客观证据，）：通过调查及提供客观证据，证实可以满足某期望用途的特定要求。证实可以满足某期望用途的特定要求。(users(usersrequirements have been met(e.g.,accuracy requirements have been met(e.g.,accuracy requirements for patientsrequirements for patients results)results)确认确认(verification)(verification)：通过调查及提供客观证据：通过调查及提供客观证据,确确认满足了特定的要求。认满足了特定的要求。(specified criteria have(specified criteria have been met(e.g.,interference criteria or been met(e.g.,interference criteria or interference claims)interference claims)9适用范围适用范围 1.1.适用大部分析方法和仪器适用大部分析方法和仪器 ，特殊，特殊方法可能需要必要的调整，如分离技方法可能需要必要的调整，如分离技术和免疫学分析方法在附录术和免疫学分析方法在附录A A中被讨中被讨论。论。2.2.血清、血浆、全血、脑脊液、尿血清、血浆、全血、脑脊液、尿和其它大多数体液等和其它大多数体液等标本类型标本类型都可用都可用本指南评估本指南评估10 3.3.适用以下干扰物质：适用以下干扰物质：n病理情况下的代谢物病理情况下的代谢物，如胆红素、脂肪、蛋白质、血红，如胆红素、脂肪、蛋白质、血红蛋白等蛋白等 ；n病人治疗期间引入的物质病人治疗期间引入的物质，如药物、肠外营养、血浆代，如药物、肠外营养、血浆代用品、抗凝剂等；用品、抗凝剂等；n病人吸收的物质病人吸收的物质，如药品滥用、营养补充等；，如药品滥用、营养补充等；n标本准备引入的物质标本准备引入的物质，如抗凝剂、防腐剂等；，如抗凝剂、防腐剂等；n标本处理过程中引入的污染物标本处理过程中引入的污染物，如手霜、滑石粉、促凝，如手霜、滑石粉、促凝剂等；剂等；n标本自身的基质效应标本自身的基质效应，其理化性质跟理想的新鲜标本不，其理化性质跟理想的新鲜标本不同。同。适用范围适用范围111.1.干扰对不准确度的影响干扰对不准确度的影响 不准确度（总分析误差）包括不精不准确度（总分析误差）包括不精密度、方法特异性偏倚和样本特异性密度、方法特异性偏倚和样本特异性偏倚（干扰），对干扰物质的敏感性偏倚（干扰），对干扰物质的敏感性可以引起系统误差和随机误差。可以引起系统误差和随机误差。基本概念基本概念122.2.分析前效应分析前效应 分析前分析物或者它的浓度的改变通常称为分析前分析物或者它的浓度的改变通常称为“分析前效应分析前效应”，这些作用可能会影响实验结果这些作用可能会影响实验结果的临床应用，但不能视作的临床应用，但不能视作“分析干扰分析干扰”。这些作。这些作用：用：n体内药物作用体内药物作用 ，如使用药物后因生理响应使激素如使用药物后因生理响应使激素浓度变化浓度变化n标本处理标本处理，由于蒸发、溶血或者血清长时间不分由于蒸发、溶血或者血清长时间不分离使电解质、蛋白、水含量改变离使电解质、蛋白、水含量改变n标本收集，标本收集，如在静脉滴注时（内含分析物）取样如在静脉滴注时（内含分析物）取样 基本概念基本概念133.3.绝对干扰与相对干扰绝对干扰与相对干扰 干扰作用可看成是绝对的或相对的干扰作用可看成是绝对的或相对的p 绝对干扰：一般病人标本中含有某物质，一绝对干扰：一般病人标本中含有某物质，一 旦它旦它的存在即会引起干扰。的存在即会引起干扰。p 相对干扰：一般病人标本中含有某物质，其含量相对干扰：一般病人标本中含有某物质，其含量相对于混合样品中的相对于混合样品中的平均浓度平均浓度，不同病人样品中，不同病人样品中含有该物质的浓度变化引起干扰作用的变化，相含有该物质的浓度变化引起干扰作用的变化，相对干扰作用在临床实验中更有意义。对干扰作用在临床实验中更有意义。基本概念基本概念14基本概念基本概念相对干扰相对干扰 一些方法可以一些方法可以校正校正干扰物的平均浓度干扰物的平均浓度做做补偿补偿，以使病人标本中的干扰效应减，以使病人标本中的干扰效应减小到最低，有代表性的方法包括样品前小到最低，有代表性的方法包括样品前处理、设置空白对照、标准血清校准和处理、设置空白对照、标准血清校准和数学校正，当干扰物的浓度大于或者小数学校正，当干扰物的浓度大于或者小于病人样本中的平均浓度时将引起误差。于病人样本中的平均浓度时将引起误差。15基本概念基本概念4.4.干扰机制干扰机制 由于某干扰物的存在以多种方式影响分析过程，主由于某干扰物的存在以多种方式影响分析过程，主要机制：要机制：u物理作用物理作用 干扰物具有的物理性质，使它与分析物一样被检测干扰物具有的物理性质，使它与分析物一样被检测出来，如颜色、光散射（光吸收）、洗脱位置、电出来，如颜色、光散射（光吸收）、洗脱位置、电极响应等。极响应等。干扰物可能会改变标本的物理特性，如表面张力、干扰物可能会改变标本的物理特性，如表面张力、黏度、浊度、离子强度等，干扰检测结果。黏度、浊度、离子强度等，干扰检测结果。16基本概念基本概念4.4.干扰机制干扰机制u化学作用化学作用 n干扰物可能会影响酶活力，例如，阻止金属激活干扰物可能会影响酶活力，例如，阻止金属激活剂结合到活性中心上去，氧化必须的巯基等。剂结合到活性中心上去，氧化必须的巯基等。n干扰物也可破坏或阻止反应，例如，破坏试剂或干扰物也可破坏或阻止反应，例如，破坏试剂或抑止指示反应。抑止指示反应。n干扰物也可改变分析物的形式，例如，形成复合干扰物也可改变分析物的形式，例如，形成复合物或沉淀。物或沉淀。17基本概念基本概念4.4.干扰机制干扰机制u非特异性非特异性 干扰物可能和分析物以同样的方式参与反干扰物可能和分析物以同样的方式参与反应，例如，苦味酸肌酐方法中酮酸干扰，重氮应，例如，苦味酸肌酐方法中酮酸干扰，重氮胆红素方法重吲哚酚硫酸盐的干扰。在免疫化胆红素方法重吲哚酚硫酸盐的干扰。在免疫化学方法中干扰物和抗体发生交叉反应。例如，学方法中干扰物和抗体发生交叉反应。例如，茶碱方法中咖啡因的干扰。茶碱方法中咖啡因的干扰。18基本概念基本概念4.4.干扰机制干扰机制u水取代作用水取代作用 非水物质（蛋白质、脂质），由于取代非水物质（蛋白质、脂质），由于取代了血浆中部分水体积，影响了一些分析物的了血浆中部分水体积，影响了一些分析物的测定。这些作用考虑或不考虑为干扰作用，测定。这些作用考虑或不考虑为干扰作用，取决于要求的结果是以总体积的浓度表示，取决于要求的结果是以总体积的浓度表示，还是以血浆水的浓度来表示。还是以血浆水的浓度来表示。19干扰实验的判断标准干扰实验的判断标准 n为保证客观性，可接受标准必须在评价实为保证客观性，可接受标准必须在评价实验验操作之前操作之前就确定。就确定。n建立可接受标准时，必须考虑建立可接受标准时，必须考虑临床意义临床意义和和统计学意义统计学意义两者之间的差别。两者之间的差别。201.1.临床可接受标准临床可接受标准p基于生理变异基于生理变异p源于临床经验源于临床经验p基于被分析物变异基于被分析物变异干扰实验的判断标准干扰实验的判断标准 212.2.统计学意义统计学意义n在确定一个物质是否存在干扰前，首先确定所得在确定一个物质是否存在干扰前，首先确定所得到的结果是否有统计学意义。到的结果是否有统计学意义。3.3.分析物检测浓度分析物检测浓度 干扰应该在两种医学决定浓度被评估，如果在一干扰应该在两种医学决定浓度被评估，如果在一种浓度上进行测试，要注意有可能漏过在其他分种浓度上进行测试，要注意有可能漏过在其他分析物浓度水平上有临床意义的干扰。析物浓度水平上有临床意义的干扰。干扰实验的判断标准干扰实验的判断标准 22干扰实验的判断标准干扰实验的判断标准4.4.干扰物检测浓度干扰物检测浓度 决定一种物质在决定一种物质在“最坏情况最坏情况”的条件的条件下是否会产生干扰，干扰筛选应该在实验