植物体叶绿素含量的测定实验报告.docx
实验报告植物体叶绿素含量的测定摘要：本实验采用分光光度法，利用95%乙醇提取菠菜叶片中和番茄叶片中叶绿体色素，叶绿素a,叶绿素b和类胡萝卜素最大吸收峰的波长分别是665nm>649nm和470rlm。根据分光光度计测定的吸光度值，从而计算出乙醇提取液中叶绿体色素含量。实验原理：利用95%乙醇提取叶绿体色素，叶绿素a,叶绿素b和类胡萝卜素最大吸收峰的波长分别是665nm>649nm和470nmo根据分光光度计测定的吸光度值，可以计算出乙醇提取液中叶绿体色素含量。实验目的：扇握分光光度计法对叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总浓度和类胡萝卜素总浓度测定和计算的方法。实验材料：生物材料：菠菜叶片0.25g,自己培养的全素番茄苗叶片0.2g,缺磷番茄苗叶片0.2g；试剂：95%乙醇、石英砂、碳酸钙；仪器：分光光度计、电子天平、研钵、漏斗、玻璃棒、小烧杯、IOml量筒、50ml容量瓶、剪刀、滤纸、滴管。实验步骤1.叶绿体色素的提取取新鲜菠菜叶片0.25g,擦干，去中脉，剪碎放入研钵，加入少许石英砂和CaCo3，再加入95%乙醇3ml,研磨成匀浆，再加95%乙醇IOmI,静置IOmin,用漏斗滤去残渣，用乙醇反复冲洗研钵、残渣至无色；用容量瓶定容至50ml。2.吸光度的测定取光径Icm比色杯，注入上述叶绿素提取液，以95%乙醇注入另一同样的比色杯内作为空白对照，在波长665、649、和47Onm下测定吸光度。3结果计算依据下列计算公式，分别计算出叶绿素a、B的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的浓度。Ca（叶绿素a）=13.95A三-6.8Cb（叶绿素b）=24.96-9-7.32A665Ct（叶绿素）=Ca+Cb=18.16+6.63MCxc（类胡萝卜素）=（100OA470-2.05Ca-114.8Cb）248叶绿体色素含量色素浓度（mgL）提取液体积（L）X稀释倍数样品鲜重（g）实验结果：菠菜叶片提取液吸光值:材料（g）/浓度（mgL）叶绿素a叶绿素b叶绿素总浓度类胡萝卜素总浓度菠菜7.822.149.962.29全素番茄3331.084.410.91缺磷番茄2.741.504.240.609材料（g）/色素含量（mg）叶绿素a叶绿素b叶绿素总含量类胡萝卜素总含量菠菜1.5640.4281.9920.458全素番茄0.830.270.110.23缺磷番茄0.5480.30.8480.122实验讨论：1、测定叶绿素ab为什么选用红光波长？叶绿素吸收红光和蓝紫光，故有两个吸收峰，光合色素还有类胡萝卜素，只吸收蓝紫光，所以不能选蓝紫光区测定，否则被类胡萝卜素干扰，只能用红光。
