实验一 无蛋白血滤液的制备 报告.docx

实验一无蛋白血滤液的制备无蛋白血滤液制备的基本原理是以蛋白质沉淀剂沉淀蛋白，用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。常用的方法有三氯醋酸法、氢氧化锌法、黑灯改良法及福林吴宪法(鸨酸法)，本实验采用最后一种方法，即鸨酸法制备无蛋白滤液。实验原理：铝酸钠与硫酸混合，生成鸨酸。血液中的蛋白质在PH小于其等电点的溶液中时，可被鸨酸沉淀。沉淀液过滤或离心，上清液即为无色、透明、PH约为6的无蛋白血滤液。可供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素、尿酸及氯化物等项目测定使用。实验试剂：10%鸨酸钠溶液，VBmOl/L硫酸溶液实验对象：新鲜鸡血操作步骤：取50ml锥形瓶或大试管1支，吸取充分混匀的抗凝血1份(ImI),擦净管外血液，缓慢放入锥形瓶或试管底部0准确用IOml移液管加入7ml蒸僧水，随加随摇，但也不能过于剧烈再加入Iml硫酸溶液，随加随摇放置约5min后，若振摇亦不再发生泡沫，说明蛋白质已完全变性沉淀,用滤纸过滤后即得完全无色的无蛋白血滤液实验过程（附图）:勺加入硫酸溶液并混匀后，可以观察到血液颜色变得暗淡，但并没有出现凝聚等反应现象,这一步主要是为铝酸（钠）与血液中的蛋白反应提供酸性环境。4.加入鸽酸钠溶液映单酸钠溶液并且混匀后，可观察到血液颜色变为棕褐色，且变得浑浊有气泡；容L器壁上有痕渍，这是因为血液中的蛋白与铝酸作用而发生沉淀的结果附录：以上实验过程（图片）是第二次操作的结果，第一次操作时因为加入试剂时过快，没有做到随加随摇，故有很多气泡，效果不是很理想，遂又操作了一次。现附上第一次操作的图片以作对比。2014.10.17（兴农楼208）