基因枪操作规程2025.docx

基因枪操作规程一、实验耗材的处理1.基因枪所处的位置及超净工作台用紫外灯灭菌1.5ho2.70%乙醇对基因枪表面以及样品室进行消毒，同时用70%乙醇将阻拦网、固定器浸泡15min,对可裂膜用70%异丙醇浸泡一下，不要超过3s,微弹载体用70%乙醇浸泡一下放在超净工作台上阴干。二、基因枪轰击步骤1 .取微粒载体，用厂家提供的嵌入工具将其固定在钢碗底部环内，取DNA与金粉混合物，吸取一定量加于微载体中央，干燥2mi11o2 .安装可裂膜于其托座上，顺时针安到加速器上，用厂家提供的专用扳手适当用力固定。3 .将空间环、阻挡网、阻挡网托座、微粒载片及固定环(带有微粒面朝下)安好，旋紧插入枪体中。4 .被轰击样品，根据参数距离放入轰击室的合适位置，关好轰击室门。5 .打开氨气瓶总阀，顺时针调节气压。一般氨压调节标准高于实验用可裂膜压力200psi(i=1.379Mpa)。6 .打开基因枪面板左侧真空泵电源开关。7 .将中间气流控制开置于“VAC”位，待真空度达到26英寸汞柱时，快速按下此开关到“HOLD”位。向上压住发射键“FIRE”保持不动，直到轰击为止。8 .将中间气流控制开关置于“VENT”位，待真空表回零取出样品。9 .把使用过的实验耗材取出来，重复步骤1-8,进行下一个样品的轰击。三'关机L把氨气瓶总阀旋紧，将中间气流控制开置于“VAC”位，待真空度达到15英寸汞柱时，快速按下此开关到“HOLD”位。间歇按压发射键“FIRE”，待氨压表（两个表）指针回零后，逆时针旋转氨压表调节阀至最小，将中间气流控制开关置于“VENT”位。10 关闭基因枪电源、真空泵电源。