常规体外受精中国专家共识（2024年）.docx

常规体外受精中国专家共识(2024年)常规体外受精(conventiona1.inroferti1.ization,c-IVF)是人类辅助生殖技术(assistedreproductivetechno1.ogy,ART)W泛应用精方式之一，其主要是针对女性因素(如输卵管性不孕、子宫内膜异位症、排卵异常及宫颈因素等)、部分男性因素(如轻、中度少弱畸形精子症)及不明原因不孕不育(卵巢功能评估、输卵管通畅度评估及男性精液分析均正常)患者所采取的治疗方案.相较于卵胞质内单精子注射(Intracytop1.asmicsperminjection,ICSI)技术而言Q1.VF的精卵结合方式更接近人类生理状态实验室操作也相对简单.然而在精液参数正常的情况下,C-IVF仍然有20%左右的取卵周期发生受精率低下(IOWferti1.izationrate,1.FR,<25%)及5%15%的取卵周期发生完全受精失败(tota1.ferti1.izationfai1.ure,TFF).目前尚缺乏c-IVF的操作标准或共识，尤其对于精液参数处于临界值的病例，授精方式的选择多根据临床医生和胚胎实验室人员的经验并结合患者病史决定，虽然做到了个性化处理，但由于缺乏有力数据的支持，无法避免发生1.FR和TFF的风跄。部分中心为了避免受精失败的发生,则会选择对全部或部分卵母细胞行ICS1.技术授精,无形中导致了ICS1.技术的过度应用。本共识根据国内外发表的文献，并结合长期实践经验，经过专家讨论制定而成.通过对C-IVF选择标准、精液的优化处理、授精操作、授精时机的选择、短时受精及早期受精判断、受精失败的补救措施、受精观察、其在胚胎植入前遗传学检测(preimp1.antationgenetictesting,PGT)与无创胚胎染色体筛查(non-invasivechromosomescreening,NICS)的应用、质量控制及胚胎实验室新员工培训与考核等多方面进行详细阐述，并提出相应推荐意见.以期为辅助生殖临床医生和胚胎实验室人员提供实际可行的建议和指导。«2附间的用大研究周期改及0方式<>MWtMTtwm.114.w>>90e-IVFS*5b(M>3h强率IUmMfik1.K<<mn716rVF1.6k<2hA>»h3床tf*yFiMB.e±UW9)a2M><-IVFG5-9b,IRifWi1.nJ.I9WXjb95ICM>3h<3bjmUv.jsooi)131)ZMOM1.7M>Xh/XAM28<-IVF<>1.,SSI(<*IVF)<X5k4>S3M«-IVF>.<2SMIZ)<-IVF)JM1.率心八门成哪”也比例（IZ）A.rta1.IWOtf21OIQ42TbObN1.M!1.-优感杯鼬率rUnrK.J.I'KM6h>7b夕浦奉.席利¢.“BKH率BnMP.Ha1.(2OI6m39”1.<2M1h29i7IJiMI/1.H4.J(201.)I46ICMI-I23h1!4再。“阿第KM篇胤件率4KH,逐羸h«F(IUM.rt(30)1mI371ICM<6hX>b般0f、*网诉户李J"4rhU(2021严SSIIICMAZIIi/*bW(M)UICS2-6k/2.naU2021.9S7SZM4Z1.3-6,Sh<1,I1.1.txU5b<<-IVF)交率Suth.H1.(2O22i-726ICM261./tt.nII；<>4<WMrt<1.*1.fitWsMX»AKtw*n*ir*t'fXWXrtft近期一项纳入了9575个周期的大型回顾性研究显示，不同的孵育时间对C-IVF卵母细胞受精能力的影响不同（15h受精率显著降低，而受精率提高可能增加累积妞限率），而胚胎发育及妊娠结局却无明显差异.因此该研究认为,体外孵育时间对卵母细胞的发育潜能无显著膨响，可根据胚胎实睑室的工作流程在一定时间范围内（孵育1.565h）安月取精时机.另外，适当延长扳机至取卵的间隔时间（3638h）同样有助于卵母细胞胞质的进一步成熟（体内成熟）,从而改善临床结局，因此授精时机的选择应结合扳机时间来决定。也有学者在授精前将COCs置于体外成熟培养液中孵育，发现可以促进胞质的成熟并提高囊胚形成率.推荐意见4:鉴于各中心'促排卵方案、扳机时间、取卵时机及患者个体间的差异,导致成熟卵母细胞（MH上匕例有所不同或卵母细胞间胞质成熟度不一致，因此授精时机的选择应综合考量后合理安排时间节点。本共识建议根据取卵后COCs的状态选择个体化的孵育时间，正常情况下建议在扳机后3840h内完成授精。五、短时受精短时受精是将精卵共孵育的时间由过夜受精的16-24h缩短至16h的一种C-IVF衍生技术.有研究显示，精子产生的活性氧可促进卵丘细胞的凋亡,且卵母细胞长期暴露在高浓度的精子中可能会对早期胚胎发育产生负面影响.另外1.i等的研究显示，过夜受精组受精液中的核离子浓度显著高于短时受精组,缩短受精时间可以显著降（髀产率。早期的荟萃分析显示，缩短精卵共孵育的时间会增加临床妊娠率、持续妊娠率及种植率.但也有研究提示，尽管短时受精比过夜受精在提高优质胚胎率、种植率和持续妊娠率方面具有优势,但受精率有所降低,且活产率和临床妊娠率并未提高.短时受精分两种：将COCs从受精液移至新的培养液中继续培养；将COCs移出受精液后对其进行腕顺粒，去除卵丘细胞及放射冠，使卵母细胞透明带完全或大部分暴露，该方法可以同时观察第二极体的排出情况，有助于尽早预测受精失败从而避免1.FR或TFF的发生.现有研究尚不能证实短时受精可显著改善ART治疗结局.对于1.FR或TFF高风跄病例（如精液参数处于临界值、不明原因不孕、不孕年限较长、多次人工授精失败等），可选择脱颗粒后进行早期受精预判。但需注意的是，受精早期颗粒细胞较为致密，脱颗粒过程中的机械应力可能对受精卵产生不利影响；另外，早期脱颗粒或与多精受精相关。对于继发不孕且精液质量较好或既往C-IVF受精正常的病例，可采用过夜受精或不进行脱颗粒操作的短时受精.推荐意见5:鉴于尚无更充分的证据表明过夜受精与短时受精在活产率方面存在差异，因此两者均可作为C-IVF的常规授精方式.对于不明原因不孕、多次人工授精（3次）失败、原发性不孕、继发不孕绑艮25年且无其他明显同意后再行冷冻保存或移植.如果对这部分胚胎进行遗传学筛直，在筛选整倍体胚胎的同时还需进一步排除单亲二倍体及多倍体胚胎。由于安全性尚需进一步的研究和评估，故临床移植OPN或IPN来源的胚胎仍需逆慎.对于有条件的中心,也可以考虑将短时受精并脱颗粒后的卵母细胞放入时差成像系统进行培养和观察,以避免原核早消失造成的误判.八、C-IVF在PGT与N1.CS周期的应用2020年欧洲人类生殖与胚胎学会发布的PGT指南依然推荐将ICSI作为PGT周期的首选授精方式。选择ICSI的主要目的是避免精子携带的父源性遗传物质的干扰及颗粒细胞引起的母源性污染.但近几年的相关研究显示，PGT周期中应用C-IVF同样可以获得与ICSI相似的胚胎发育结局和遗传诊断结果.因此，对于非男性因素不育行PGT的病例，ICS1.是否仍然作为首选授精方式产生了争议。2020年美国生殖医学学会和辅助生殖技术学会发布的非男性因素ICSI适应证委员会意见中指出，在非男性因素行PGT周期的情况下，ICSI仅限在精子DNA可能对检测结果准确性造成影响的情况下应用。这归因于部分扩增技术(如MA1.BAC.PicoP1.EX)较难扩增出精子DNA,父源性污染的发生率可忽略不计。但多重置换犷增技术(mu1.tip1.edisp1.acementamp1.ification,MDA)中使用的碱裂解法对细胞裂解效力更强，可以实现精子DNA的扩增，因此基于MDA的PGT周期不能选择C-IVF作为授精方式。2023年国际生殖遗传学学会发布的PGT指南认为，使用汽胚滋养层细胞活检结合第二代测序(next-generationsequencing,NGS)技术的PGT周期，可以采用C-IVF作为授精方式，但应尽是避免附着在胚胎上的精子或颗粒细胞的污染.同样，也有研究表明在NICS周期中，利用C-IVF与ICSI来源的囊胚培养液进行NICS检测的结果相似，并且检测结果的准确性与滋养层细胞活检相比无差异。推荐意见8:本共识建议ICSI作为PGT周期的首选授精方式.对于胚胎植入前非幽能椒9（preimp1.antationgenetictestingforaneup1.oidies,PGT-A）周期也可考虑选择C-IVF作为授精方式，但应严格限制使用条件并签署知情同意书。基于MDA的PGT周期仍需选择ICS1.授精。应用N1.CS技术进行胚胎优选，可考虑选择C-IVF授精.九、C-IVF的质量控制及胚胎:员工培训与考核1.C-IVF的质量控制指标及参考标准：根据2017年维也纳共识及胚胎实验室关键指标质控专家共识中的指导意见，将C-IVF实验室质控指标的计算方式及参考标准归纳如下，详见表3.表3C-IVF实验室质控指标及参考标准质控指标计算男螂肆：/卜正常受精率=授精后1618h出现>60%>75%2PN及2PB的卵母细胞数/行授精（最低标准）（理想标准）的COCS总数X100%受精失败率=受精失败周期数/行授精<5%周期数X100%多PN率=大于2PN卵母细胞数/行授<6%精的COcS总数X100%IPN率=IP、卵母细胞数/行授精的<5%CoCS总数X100%注：正常受精率和受精失败率为关键质控指标；多PN和IPN率为一般质控指标;PN示原核；PB示极体;CoCS示卵丘.卵母细胞复合物2.辅助生殖实验室新员工培训与考核：c-IVF的技术操作相对简单，应从精子动静态分析、精液的优化处理、检卵、颗粒细胞去除以及早期受精的判断（短时受精）等方面进行重点培训.并且培训完成后需通过相应的考核方能上岗，当考核指标和同期同条件下的质控指标与带教老4币偏差较大时,应积极帮助新员工寻找原因并及时给予纠正.推荐意见9:辅助生殖实验室新员工在进行岗前培训期间，要求充分掌握世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册（第六版）中ART相关理论及操作技能，充分了解精子动静态分析技术及相关指标临床意义，并能够熟练学握精子浓度、形态及活动率计数.对不同质Ja精液进行优化处理时，当处理后TPMC和前向运动精子百分率与带教老师差异小于10%后（=10）,方可开始尝试进行!临床操作.酶员工须在经验丰富的带教老师指导下完成至少50例捡卵操作并有能力对COCs进行初步评价。卵母细胞脱颗粒的前期培训包括巴氏吸管或剥卵针口径的选择、剥卵时吹吸力度、幅度、频率及体夕限作时间的控制等.操作熟练后，可在带教老师指导下对12枚卵母细胞（应选择获卵数15枚的病例）进行脱颗粒操作，建议累计操作至少100枚卵母细胞,且后续胚胎发育指标达到中心同期质控要求.当对早期受精进行判断时，在严格控制体外观察时限的情况下判断结果与带教老师差异小于10%后（O=100）,方可开始尝试进行临床操作.十、相关操作参考方法1 .精液优化处理参考方法（I）DGC法：在15