《动物组织中氯丙嗪的残留测定-酶联免疫吸附法》征求意见稿.docx
ICSDB34安徽省地方标准DB34/Txxx-2024动物组织中氯丙嗪的残留测定酶联免疫吸附法DeterminationofCh1.orpromazineinAnima1.tiSSUeEnzyme1.inkedimmunosorbentassay（征求意见稿）2024-XX-XX发布2024-XX-XX实施安徽省市场监督管理局发布本文件按照GB,TII-2O2Oq标准化工作导则第I部分：标准化文件的结构和起卓规则3的规定起里。请注意本文件的某些内容UJ能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的货任，本文件代替DB34"1373-2011动物组织中氯丙嗪的残刊测定一篇联免疫吸附法，除编耨性修改外主要技术变化如下：增加方法检出限、定Ift限：修改了范例（见第I章）：脩说了样品处理（见第7.1枇）；增加了灵敏度（见第9章）；本标准山安徽省兽药惘料监察所提出.本标准由安徽省农业农时厅归口.本标准起草单位：安徽省苫药饵料监察所,安救中有检验检测有限公司、安徽褰如分析检测科技有限公司、安徽科博产品检测研究院有明公司等。本标准起草人：刘发全等本标准2011年9月发布,本次为第一次修订.动物组织中氯丙嗪的残留测定-酶联免疫吸附法1范国本文件规定了动物肌肉、肝脏、肾脏和禽蛋中氯丙嗓残用信的物联免疫吸附测定方法，本文件适用于动物肌肉、肝脏、好肮和禽货中氯丙嗪残剂Ift的快逑筛选测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注I1.期的引用文件,仅所注t1.期的版本适用于本文件.凡是不让日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件.GB/T6682分析实验空用水规格和试骁方法3试样制备采集的动物加织应保存于T8C的冰柜中，用前饯立至室瓢，需用.4原理本方法是附联免授法中的竟争性测定法，其主要原埋是：样M中游离的就丙嗪与陪标板上固定的氯丙嗓抗原竞争特异性抗体再通过的标H抗的反应，洗抻游恩的前标物，再通过险的专一性显色剂显色，根据显色的深浅来判断样品中氯丙喳的含就，根据竞争性原理，样品中游离的氯丙噪少.则脚标H抗结合多,U色就深，相反，则显色法“结果可以通过在45Onm处测定吸收（ft计算,颜色变化的程度反映样品中氯丙味的含届,在一定浓度范阚内吸光度的Ifti低与样品中氯丙喙的含量成反比.5试剂和材料除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水符合GB/T6682:级水的规定。1.1 竞争海标免疫法氯丙曜试剂盒，2C8C冰箱中保存。1.1.1 微孔板：包被有氯丙嗪抗原.1.1.2 於丙喙标准溶液：0ngm1.0.1.ng三1.0.311m1.0.611m1.1.25ngm1.,5.00nga1.5.1.3醇标物冻干粉：1瓶.1.1.4 曲标物稀择液:13m1.,I瓶。1.1.5 陶标物溶液：临用前取回标物冻干粉，准确加入的标物稀和液12此，摇匀。1.1.6 显色剂：13m1.,1瓶。1.1.7 终止液：13m1.1瓶。1.2 样品硫糅液：用水K）倍稀林厂商提供的浓缩样本稀择液.1.3 清洗液：用水10倍桶择厂商提供的浓缩洗涤液.1.4 组弱化钠。1.5 甲仇5. 6乳辄化钠甲酹溶液：称取0.Ig氢就化钠,用甲酹溶解定容至100m1.6仪器和设备5.1 防标仪（归备45OrU1.越光片）.5.2 振他器，6. 3恩心机，不低F6000rmin,6.1 分析天平：感量0.000OIg,感量0.001g,M0.01g.6.2 组织匀浆机.不低于100OOrmin.6.3 觥吹仪。6.4 微Iii加样器及此套吸头：单道20I.,5()1.,1001.10001.多道501.3001.7测定步舞6.5 样品处理称取2.（三）.05g均质后的组织样本于50m1.离心管中,分别加入2«12.5%三氯乙酸.6>乙脑，涡动5min,4000g以上，离心5min,取2m1.上层液于50m1.高心管中加入2m1.的3Y氢氧化钠溶液，再加入1.51的正己烷，漏动5.in,100Og以上，离心5min,取上层有机相3m1.于干净离心管管中，50-6Oc水浴氯气吹干，加入05m1.坂溶工作液，用涡艇仪涡动Imin.溶斛干燥的残刷物，取50H1.进行检测.6.6 测试程序7. 2.1测定在室温20T25C条件卜操作，测定之前将试剂盒以及所有试剂在室淑(20C25匕)下放置1.h2h.8. 2.2将足峡标准和样品所用数量的微孔条插入微孔架.标准和样品做两个平行实物.记录下标准和样M的位S1.9. 2.3分别在各孔中力I1.501.的标准品溶液或样品溶液，10. 2.4分别在各孔中加1001.的脩标物溶液。11. .5前好盖板原，轻轻晃动反应板效秒，25±2T反应IC1.min12. .6馈出微孔中的液体,加2501.清洗液.轻轻振荡30s.做出微孔中的洗涤液,在吸水纸上拍打，彻底清除微孔中的残留液和气泡,Ift笈上述操作3遍.7.2.7立即在每孔中加入1.(X)1.显色剂.7.2.8 萩好靛板膜，轻粒见动反应板效秒，25±2£反应IOmin.7.2.9 每孔加100I.终止液(推荐使用多通遒加样器)，轻轻振荡混匀，1Omin内在45Onm下检测吸光度.8结果判定和表述按下式计算百分吸光度伯：P百分吸光度值(%)=高X100%<1>式中：B为标准溶液或供试样品的平均吸光度值：BO一为零标准的标准溶液平均吸光度值：用专业计算机软件求出供试样从中氯丙嗪的浓度，乘以稀称系数即得检冽结果.或计算出的标准相对吸光度值绘成为一个对应浓度(ngm1.,>的半对数坐标系统曲践图，校正曲戏在OJn"m1.5n三1.范树内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度(r>三1.)可以从校正曲线上读出.9检测方法灵敏度、准确度、精密度9.1 灵敏度本方法在动物肌肉、肝脏、忏腑和席蛋等组织中的检出限为0.51*gkf>DB34,TXXX-2(>249.2 准确度本方法在100g1.kg添加浓度水平上的回收率为70%120%«9.3 精定度本方法的批内变异系数C'%W10%,批间变异系数CV%W15%。
