挥发脂肪酸含量的测定.docx

挥发脂肪酸含量的测定A1试剂Al.1甘油：分析纯。Al.250%(%/力)氢氧化钠溶液：贮于密封的塑料瓶，使用时吸取清亮而没有沉淀的上清液。Al.3硫酸溶液，c(l2H2S0.1)=lmolLAl.4酚醐指示剂：取0.5g酚猷溶解于IoomL95%(。)乙醇中。Al.595%(%)中性乙醇：使用前中和至酚战刚显粉红色。Al.6氢氧化钠标准溶液:c(NaOH)=0.lmolLoAl.7沸石：将沸石粉碎过筛，取0.18mm-0.30mm大小的颗粒。A2仪器设备A2.1刻度量筒：10OmL容量。A2.2吸量管：IoOmL和50mL容量。A2.3蒸馆仪：蒸馆仪的形状和大小按图Al所示，固定于蒸馆支架上。各组件的要求按A2.3.1-A2.3.6的说明。A2.3.1蒸储头：蒸储头的开关和大小见图A2。蒸储头的管壁厚L25mm±0.25mm。其长臂的球泡下部通过橡胶塞连接于蒸储瓶。蒸馆头侧孔中心以上IOmm处有较小的内表面。A2.3.2平底蒸储瓶：由硼硅玻璃制成。容量为310L±IOmLA2.3.3冷凝管：玻璃管型。内管的外径12mm±0.5m11b壁厚LonIm±0.2mm；外套管的外径30mm+2mm,壁厚1.25mm±0.25mm,冷凝管上端接口处的内径。2Omm±1mm,壁厚为L25mm÷0.25mm,>A2.3.4接收瓶：瓶的结构类似容量瓶。瓶颈部标有两个刻度，一个为IOomL,另一个为IlOmLoA2.3.5石棉板：直径12Omnb厚6mm,中心孔直径约65mm。石棉板用于支持蒸馆瓶在加热器上，防止火焰直接烧到石棉板以上的玻璃表面。蒸馆瓶的平底应刚好接在石棉板的中心孔内。A2.3.6电热炉，2000W,热力应足够大，能使蒸馅操作在规定时间内完成。A2.4分液漏斗：25OmL容量。A2.5滴定管：25mL容量，管的顶端连接装有钠石灰的保护管。A2.6中速滤纸：直径为9cm。A3分析操作程序A3.1取样，按GB/T5524进行。A3.2称取样品：精确称取样品5.00g,精确至0.001g。送样品入平底蒸储瓶内时，注意不要将样品粘到瓶颈。平行称取两份样品。A3.3样品的制备A3.3.1皂化将20g甘油加入到称取的样品中，再用滴定管加入50%氢氧化钠溶液2.OmL,滴定前应注意抹去滴嘴处的碳酸盐沉积物，放掉前几滴氢氧化钠溶液，之后才开始正式滴定。加入碱溶液以后即连续摇匀（包括使被粘附到瓶上部的所有油滴溶解），并在火焰上加热使之完全皂化,液体变清亮。皂化完后用玻璃表面皿盖好瓶口。皂化过程要注意避免过热。7GB/T18009×××X单位：mm30±2 一一外径内径20 ± 1图Al挥发脂肪酸蒸馅仪将皂化液冷却至90°C左右，用经过沸腾了15min的沸水烫洗干净的量筒，量取93InL同样的沸水，立即例入皂化液中，注意要将量筒内的沸水倾倒干净。轻轻摇动瓶内的皂化液使之完全溶解。如果皂化液不清亮，表明皂化不完全。当皂化液变黑而不是浅黄色时，表明加热过度。遇到加热过度这种情况时，要重新称取样品进行新的皂化。在进行以上操作的同时，用同样数量的甘油代替油脂样品进行空白试验。具体操作同上。A3.3.2蒸馈取0.Ig沸石加入装有皂化液的蒸储瓶中，再加入浓度为LOmOI/L的硫酸溶液50mL,然后立即将蒸储瓶接到蒸储仪上进行加热，使不溶于水的脂肪酸完全溶化，此时注意不要让皂化液沸腾。然后加大火力，提高加热速度，要求在19min-2Inlin内蒸偏出IlOmL蒸馅液。蒸偏过程要注意保持足够快的冷却水流，以保证流出的蒸储液在18-21。收取到IlOmL蒸储液后立即撤去热源，取下接收瓶并用塞子塞好瓶口，小心不要摇动瓶内物。另用25mL量筒接收剩余的蒸储液。将盛有蒸储液的接收瓶置于15的水浴中冷却IOnlin,水浴的水面要与接收瓶的内容物等高，液温平衡后取出，擦干瓶外壁，慢慢倒转瓶子，避免水不溶性脂肪酸粘附塞子。上下倒转4-5次使瓶内物混合均匀。混匀过程注意不要强烈振摇。8GB/T18009×××X60o±21C+I08107. 5 ± 2. 5单位：tnmz+1oeA2图A3.3.3过滤将干燥的中速滤纸紧密铺贴于过滤漏斗上，将接收瓶中的全部溶液滤入干燥的分液漏斗内，待水不溶性脂肪酸上浮到液体表面，小心放出下部的水层到干燥的250InL三角瓶中（要注意保证所有的不溶性脂肪酸均保留在分液漏斗内），用塞子塞好。三角瓶中的水层溶液作为滤液1,供测定水溶性挥发脂肪酸值使用。取下蒸储头，用15InL冷水依次洗涤冷凝管的内壁、接收剩余蒸储液的量筒、接收瓶、滤器以及分液漏斗。该洗涤水再用滤纸过滤。滤器的大水应能使15mL溶液正好充满至滤器边缘。重匏以上洗涤过程两次以上，每次的洗涤水都要完全滤干，保留滤纸，弃掉滤纸。为了完全溶解并收集水不溶性脂肪酸，取15mL中性乙醇代替以上的洗涤用冷水，重匏以上的洗涤过程两次以上。每次洗涤均经冷凝管、量筒、接收瓶、滤器、分液漏斗，再滤纸。将每次乙醇滤液收集于干燥的25OmL三角瓶中，塞好塞子。乙醇滤液作为滤液2,供测定水不溶性挥发脂肪酸值使用。A3.4样品测定A3.4.1水溶性挥发脂肪酸值的测定：用吸量管吸取IoomL滤液1于干燥的三角瓶中，加入0.2mL酚猷指示剂，用0.lmolL的氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色，记录耗用标准氢氧化钠溶液的亳升数。水溶性挥发脂肪酸值按式(Al)计算：水溶性挥发脂肪酸值=(%-七)X(Al)100式中：V,滴定水溶性挥发脂肪酸值所消耗的0.lmolL氢氧化钠溶液亳升数，mL;%一空白滴定所消耗的0lmol/L氢氧化钠溶液亳升数，mL;9GB/T18009×××X一IlOnlL接收液，经处理过滤后，取100nlL滤液供滴定时的校正值。100A3.4.2水不溶性挥发脂肪酸值的测定：取全部滤液2(乙醇洗脱液)，加入0.lmol/L的氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色，记录耗用标准氢氧化钠溶液的亳升数，按式(A2)计算：水不溶性挥发脂肪酸值=(%-%)(Al)式中：%滴定水不溶性挥发脂肪酸值所消耗的0.lmol/L氢氧化钠溶液亳升数，mL;%一空白滴定所消耗的0.lmol/L氢氧化钠溶液亳升数，mLo如果在大气压较低的高海拨地区测定挥发性脂肪酸值时，测得的结果会偏低，此时可用式(A3)X式(A4)校正。水溶性挥发脂肪酸值二(测定值T""S60+10IgP(A3)匕*"行，、测定值X(76045)水不溶性挥发脂肪酸值(mL5g)P-45(A4)式中：P一一测定地点当时的大气压力，Pa0