实验动物 SPF猪剖腹产技术规范.docx

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1、ICS65.020.30CCSB44实验动物学会团体标准T/CALASxxx-202x实验动物获取SPF猪的剖腹产技术规范1.aboratoryanimal-TechnicalspecificationofcaesareansectionforobtainingSPFPigS（征求意见稿）202x-xx-xx 实施202x-xx-xx发布中国实验动物学会发布前言本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国实验动物学会归口。本文件由全国实验动物标准化技术委员会

2、(SAC/TC281)技术审查。本文件由中国实验动物学会实验动物标准化专业委员会提出并组织起草。本文件起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、东北农业大学、哈尔滨医科大学附属第二医院。本文件主要起草人：王伟、魏成威、关雪、夏长友、高彩霞、李昌文、陈洪岩、刘怀然。实验动物获取SPF猪的剖腹产技术规范1范围本文件规定了获取SPF猪的剖腹产过程中妊娠母猪的选择、术前准备、保定与麻醉、剖腹产手术、新生仔猪处置、母猪护理的要求，描述了对应的证实方法。本文件适用于利用生物学净化方法从普通级猪和SPF猪获取SPF猪的剖腹产手术。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款

3、。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB14925实验动物环境及设施GB50333医院洁净手术部建筑技术规范GB/T16551猪瘟诊断技术GB/T18641伪狂犬病诊断方法GB/T27416实验动物机构质量和能力的通用要求GB/T35823实验动物动物实验通用要求GB/T39760实验动物安乐死指南NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T679猪繁殖与呼吸综合症免疫酶试验方法NY/T3466实验用猪微生物学等级及监测SN/T1919猪细小病毒病检疫技术规范3妊娠母猪的选择3.1 普通级猪3.

4、1.1 妊娠母猪应选择未注射PRRS疫苗，临床上无猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病、猪细小病毒病等经胎盘垂直传播的疾病症状的猪场。3. 1.2胎次宜选择第二至第六胎妊娠母猪。3.1. 3剖腹产前现场采集用于检测猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病、猪细小病毒病的样本，按NY/T541规定执行。3. 1.4猪瘟病原按GB/T16551规定的方法进行检测和判定。3.1. 5猪繁殖与呼吸综合征病原按NY/T679规定的方法进行检测和判定.3.2. 6猪伪狂犬病病原按GB/T18641规定的方法进行检测和判定。3.3. 7猪细小病毒病原按SN/T1919规定的方法进行检测和判定。3.4. SPF猪

5、3. 2.1胎次按照3.L2要求选择。3.2.2微生物学指标按NY/T3466规定的方法进行检测和判定。3.3手术时间预产期前一周观察妊娠母猪分娩征兆，宜接近自然顺产时间实施手术。4术前准备4.1环境和设施4.1. 1保育猪舍应符合GB14925要求。4.2. 2手术室应符合GB5033311级洁净手术室要求。4. 2设备和器械4. 2.1动物用外科手术台，台面长度和宽度宜220OmnlX800mm。4. 2.2动物用呼吸麻醉机，风箱和风箱罩适用于100kg300kg动物，气流速度不小于lLmin4. 2.3动物用监护设备，用于测量动物呼吸频率，心率，血压和血氧饱和度等常规参数。4. 2.4仔

6、猪保育设备，猪床长度和宽度宜220OmmXl800mm。4. 2.5经灭菌的剖腹产常规手术器械，包括手术刀柄、刀片、止血钳、手术剪、手术镜、肠钳、持针器、缝针、缝线、创巾、敷料、绑定绳、毛巾等若干。4. 2.6脊髓穿刺针、猪用开口器、动物用喉镜，使用前应灭菌。4. 2.7经灭菌消毒的20mL金属注射器、5mL和10mL一次性注射器若干。4. 3药品4. 3.1麻醉药品4. 3.1.1丙泊酚注射液。4. 3.1.2异氟烷。4. 3.1.3盐酸利多卡因注射液。4. 3.2急救药品4. 3.2.1硫酸阿托品注射液。4. 3.2.2盐酸肾上腺素注射液。4. 3.2.3尼可刹米注射液。4. 3.2.4盐

7、酸纳洛酮注射液。4. 3.2.5酚磺乙胺注射液。4. 3.3常用药品4.3.3.1碘伏。4.3.3.2酒精。4.3.3.3新洁尔灭溶液。4.3.3.4过氧乙酸消毒液。4.3.3.5生理盐水。4.3.3.6葡萄糖注射液。4.3.3.7广谱抗生素(如头泡类等)。5保定与麻醉5.1保定5.1.1妊娠母猪称重、记录后，用温热清水冲洗全身，喷涂0.1%新洁尔灭溶液，暖风吹干，再进入手术室。5.1.2妊娠母猪采用侧卧或仰卧保定，固定头及四肢后，腹部全部涂抹现碘伏进行消毒。5.2麻醉5.2.1麻醉方法采用吸入麻醉结合局部麻醉，应符合GB/T27416规定。5.2.2手术前禁食12h,实时监测母猪的呼吸频率、

8、心率、血压、血氧饱和度等生理指标。5.2.3麻醉前检查呼吸麻醉设备，确认监护设备的功能完整性以及麻醉机的气密性。5.2.4妊娠母猪预吸氧3Inin5min(3Lmin),肌肉注射硫酸阿托品(0.04mgkg),15min后耳缘静脉缓慢推注丙泊酚(7mg/kg),监测麻醉状态，直至四肢肌肉松弛、下颌松弛并可将舌拉出口腔即刻停止推注。5.2.5用开口器打开猪上下颌，迅速进行气管插管，连接呼吸麻醉机，设置潮气量(Vt)10mLkg,呼吸频率15bpm,氧气的气流速度1Lmin,呼吸比2:1,异氟烷吸入浓度设置为2%3%维持麻醉，术中可根据母猪临床体征进行适当调节。5.2.6局部麻醉采取硬膜外腔麻醉与

9、切口线性阻滞麻醉。用脊髓穿刺针经腰荐结合处进入硬膜外腔后，推注盐酸利多卡因(0.2mg/kg).手术切口可使用盐酸利多卡因(0.2mg/kg)进行线性阻滞麻醉。6剖腹产手术6.1 术部选择6.1.1 腹侧壁斜切口沿左侧或右侧髓结节下角与脐孔连接线中点作为切口中点，平行最后肋弓做15Cm20CIn的斜切口。6.1.2 腹中线旁切口在最后3个乳头外侧乳腺基部以外3Cm4Cm处，做20Cln左右平行于腹中线切口。6.2术部消毒6.2.1在手术准备区，剃除术部切口两端20Cm30CIn范围内被毛，用温热清水冲洗，再用01%新洁尔灭溶液清洗术部。6.2.2妊娠母猪麻醉后，对术部距创缘20Cnl以上范围剃

10、毛，并用温热清水冲洗。6.2.3用灭菌纱布擦干，使用75%酒精脱脂。6.2.4用现碘伏消毒创术部，使用75%酒精脱碘，覆盖创巾并使用无菌自粘外科手术膜进行覆盖。6.3剖宫产手术6.3.1切开腹壁切开术部皮肤，钝性分离皮下组织，逐层切开肌层直至腹膜，暴露腹腔。6.3.2探查子宫暴露腹腔后，将手伸入腹腔探查子宫，确定子宫中胎儿情况，将一侧子宫角牵引至切口外，并用浸润过温生理盐水的纱布覆盖。根据胎儿数量及分布位置确定另一侧子宫角的暴露程度，不应过度牵拉。6.3.3取出胎儿6.3.3.1子宫角暴露后，于一端子宫角基部近子宫体处、于大弯部纵向做一个5Cln8cm切口，逐个取出胎儿。6.3.3.2若两侧胎

11、儿均超过5头，在两个子宫角的中段分别做1个切口，逐个取出胎儿。6.3.4术后缝合6.3.4.1探查并确认胎儿数量和取出胎盘数量，检查两侧子宫角内有无残留胎儿。6.3.4.2清理干净后，缝合子宫创口，创口进行两层缝合，第一层连续缝合，第二层内翻缝合。6.3.4.3以含广谱抗生素的温生理盐水冲洗体外子宫，冲洗时使用灭菌纱布对创口进行堵塞与保护，避免冲洗液流入腹腔，冲洗干净后将子宫还纳回腹腔。6.3.4.4依次缝合腹膜、各肌肉层及皮肤。6.4 子宫摘除取胎术6. 4.1切开腹壁按照7.3.1规定执行。7. 4.2将双侧子宫角及子宫体全部牵引至腹腔外，全部牵出后，在子宫颈处使用2把肠钳双重夹持，进行子

12、宫隔断。8. 4.3隔断子宫后将输卵管、子宫颈结扎，进行全子宫摘除术，摘除后，子宫断端包埋缝合。6.5 将摘除的子宫放入含有0.5%1.0%过氧乙酸中消毒10S20s应在30S内将摘除的子宫传送至保育装置内，切开子宫，取出胎儿。6.6 妊娠母猪按照GB/T39760规定实施安乐死术，残体按照GB14925规定进行无害化处理。7新生仔猪处置7.1 仔猪结扎脐带，距脐孔3cm5cm剪断，用1%碘伏浸泡脐带断端，并用灭菌毛巾迅速清理口鼻黏液，擦干体表并按摩体表，躯体做屈伸运动。必要时进行胸肺匏苏和急救操作。7.2 确定生命体征良好，称重记录，置于保育箱内哺育。1.2 母猪护理1.3 1术中护理母猪在手术过程中以80mL/h的流速维持耳静脉输入10%葡萄糖注射液，至手术结束。8.2 术后护理8.3 应为术后母猪留有适当活动的饲养空间，以防止腹腔脏器发生粘连。8.4 连续3d肌注广谱抗生素，以防感染。8.5 每日用魏碘伏消毒创口2次，2周3周拆除皮肤缝合线。8.6 应单独饲养，给予易消化、营养丰富的流质食物，营养与卫生符合GB/T27416规定。