动物实验基础知识 饲料、饮水及饲养环境.docx

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1、动物实验基础知识饲料、饮水及饲养环境第一，实验动物的选择概述第二，实验动物如何辨雌雄第三，实验动物的适应性饲养第四，实验动物的饲料（普通饲料、特殊饲料）第五，实验动物的饮水第六，实验动物的笼具第七，实验动物的垫料第八，实验动物的饲养环境第九，实验动物的护理（造第一，实验动物的选择。实验动物如何选择？这个问题对于药理和实验动物专业的朋友来说，不是难事。但对于需要做动物实验的其它专业的朋友来说，有时候会感到茫然。或者没有自己的思考，照抄别人的做法。对于这一部分站友，我们不可能要求去系统学习医学实验动物学，但我们可以常备一本在身边。在需要用的时候翻一翻，将会使你豁然开朗。因为书中比较详细地介绍了常用

2、实验动物的解剖生理、生物学习性等等，最主要的是它为你选择什么样的实验动物提供了重要的参考。因此，系统学习或者零星地翻阅医学实验动物学是保证合理选用实验动物的基础之一。再者就是要参考大量文献。在此，我不想对这一问题全面展开，只是提几点原则和方法。第一，做什么样的实验？什么动物适合本实验？做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢？我想，大多是参照文献，再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了，因此不会陌生。如：做高血脂、动脉粥样硬化，我想大多数人会选择大鼠、兔子，也可以选金黄地鼠、鹤鹑，少数人会选小鼠，但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要

3、选择比较容易形成此疾病的动物，且要易得。所以，对于不太熟悉的人来说，要多看文献，参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解，系统学过这方面知识的，也要多看文献，综合权衡。切忌随意地凭空想像。第二，采取什么样的方法造模？做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式？这要从实验的目的及条件入手。造糖尿病，可以用手术，也可以用药物。其中药物有四氧嘴陡及链腺佐菌素（STZ）。后者用得较多，且为国际认同。而四氧嚏嚏目前用得较少了。造模方法一是参照药理实验方法学，二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做手术造动脉粥样硬化.我想用大鼠比小鼠来得方便吧？第三，经费承受能力如何？做实验也要精打细算。不

4、可能为了所谓的高水平、高端技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型，假设经费只有一万多元，一定要弄个敲除APoE基因的小鼠来做恐怕没人认同。做一个简单的镇痛抗炎实验，你非得要用SPF实验室，这也是不太实际的，也是没必要的。就像一个刚刚能满足温饱的人突然要花上很多钱去国外旅游一样，是不切实际的。因此，实验经费让我们有时不能达到理想的状态。但是，科研并不一定是要用高端的技术、高级的动物,而是要能解决问题。能用简单的技术、普通的动物解决问题的，就不必去盲目追求更高。过于理想化、不考虑经费问题，是不少研究生初涉实验时的通病。第四，多了解一下实验中可能出现的问题。有不少人做实验时根本没有考虑可能出现的失

5、误，因而在实验出现问题时茫然无措。即使是造同样的疾病模型，不同的动物表现可能有不一样的地方。要对这些问题有充分的了解，并要进行必要的预试。要了解动物的习性，并进行必要的护理。因此，在你决定了选择何种动第二，实验动物如何辨雌雄？这个问题应该是每个初涉动物实验的人完完全全掌握的,是不容许有任何一点差错的。如何辩？当然是看生殖器了。一般大动物好辩，像狗，猴等；小动物及中等大小的体型的难辨一点，如：小鼠、大鼠、兔。可有下列方法来鉴别：1.看肛门与生殖器之间的距离：雄性隔得远，雌性隔得近。雄的生殖器与肛门间有阴囊，不过幼龄时不太明显。2.雄性阴茎朝头的方向突出，可轻轻挤压包皮使其露出而确认。雌性较小时可

6、见闭合的阴道口，挤压亦可张开。像兔、豚鼠等，阴茎短小.故较难辨认。最好是挤压生殖器以确认。看得熟练了，其实也不难。生殖器处呈O型者，为公的；生殖器处呈V型，下端裂缝延至肛门者，为母的。这主是针对幼龄的动物而言。3.看乳头或睾丸。成年的动物比较好辩认。母的有乳头,雄的有睾丸。但在比较小的时候，乳头，睾丸并不是那么明显的。辨雌雄的目的就是为了分笼饲养,避免雌雄同笼而交配,无法进行实验。不过，即使是同性的放在一笼，有些细节仍值得注意。说一个小插曲：本人有一次将两批做实验剩下的小鼠弄到一个笼里。结果发现大的小鼠不断追逐小的小鼠，且试图交配。一师妹在旁说，是不是我弄了只雌的进去了？我仔细检查了一下，根本

7、没有弄错。放回去,过了一会儿又发现如此现象。后来我想可能是因为大的小鼠(25g30g)已完全性成熟，在找不到雌性的情况下来追小的雄性小鼠(15g18g)以获得性的满足。这岂不成了同性恋？因此，动物的日龄相差太大的不要放在同一个笼里，以免发生上述现象。当然，一般而言,一个笼子养多个动物的主要是小鼠、大鼠、豚鼠、金黄地鼠等小动物,像兔子、狗一般都是一个笼子一只。刚开始一定要认真仔细地观察，这样会有一些经验。熟悉以后，可以很迅速很准确的分出来。对初学者而言，我建议用第2种方法予以确认。一般提供商将动物送来时，都是已经分好了雌雄的。但我们仍要亲自进行确认。一旦有一只混入异性群中，可能给实验带来极大的影

8、响，甚至前功尽弃。第第三、实验动物的适应性饲养所谓适应性喂养，是指实验动物由繁殖地或供应商处搬到实验动物房以后，在实验之前，为了使之适应环境而喂养几天的过程。这一过程非常重要，却往往不受人重视。这一过程一般至少为期三天，最好是一周。为什么要进行适应性喂养？第一，因为动物从一个地方进入到新的环境之后,它们要自行调整一下,才能适应。就像中国队员到外国踢足球要倒时差一样，动物们也要调节调节。因为运输、转移过程中，动物原有的自身节律受到了影响，需要恢复或适应新的节律。第二，在适应性喂养期间可密切观察动物是否健康？如果动物运来之时就带有疾病，则可能在此期间表现出来。这让我们对此有一个缓冲期。不至于拿有病

9、的动物匆匆忙忙在做实验。虽然不是所有有病的动物都在这几天看得出来，但这几天确实给了我们一个重要的参考。怎样使之适应？第一，配置好饲料、饮水、垫料，做好通风，12h-12h明暗交替。努力使之在新家舒服地过好日子。第二，密切观察其毛发、排泄物、活动情况。这是考察动物是否有病的外在表现。第三,注意与实验室原有饲养的动物隔开一定的距离。其它动物的声音、排泄的氨对新来的动物有一定的影响。如发现动物有个别状态不佳者，应立即隔离，并分析原因。有三分之一以上状态不佳者，高度怀疑动物有疾病。有死亡者，高度怀疑此批动物有问题（I适应性喂养，是保证实验成功的前提之一。在此期间发现第四、实验动物的饲料。饲料是一个很重

10、要的方面。我们要了解常用实验动物基本的饲料组成。同时，也要了解造一些疾病模型所需的饲料组份（如：高脂模型，缺铁性贫血模型等）。因此，下面分普通饲料和特殊饲料两部分来讲。A普通饲料以常用的实验动物为例，我们来讨论一下它们饲料的组成。一是小鼠、大鼠的饲料。以玉米、大豆、秋皮、鱼粉为主,辅以复合维生素、骨粉、微量元素。一般做成长圆柱状形。或日粗棒形。直径在Icm左右。这样的饲料又称为颗粒饲料（本人觉得此名称不妥，是否可称为条状饲料、棒状饲料？）颜色一般为大豆黄色。小鼠、大鼠的饲料为全价饲料，即不需要再添加任何营养成分。二是豚鼠、兔子的饲料。以苜蓿、玉米、大豆、秋皮、鱼粉为主,辅以复合维生素、骨粉、微

11、量元素。与小鼠、大鼠的饲料相比，主要是苜蓿的比例达到了40%左右。一般做成细长圆柱形。或日细棒形。直径在0.3cm左右。颜色呈带一点斑驳的青色。豚鼠、兔子的饲料成份基本一样,只是比例略有不同,一般可以共用。因二者不能自身合成维生素C,所以苜蓿粉的比例较大。但，饲料是加水润湿后，经高温高压而制成,维C及酶类等已部分破坏。豚鼠、兔子饲料不是全价饲料。因此，在饲料之外，仍要加少许青菜或青草，否则有的状态不佳甚至死亡。本人也曾用在饮水中加维C片的方法，但效果似不如直接给予青菜。三是狗的饲料。以肉粉、玉米、大豆、款皮、鱼粉为主，辅以复合维生素、骨粉、微量元素。有膨化饲料。一般要增加肉类食物。四是猴的饲料

12、。猴为杂食性。喂以混合精饲料并辅以苹果、葫萝卜。混合精饲料组成：玉米粉60%,谷粉20%,面粉15%,黄豆粉5%,再加上骨粉、鱼粉、糖、食盐、维生素等。幼龄动物通常要加上奶粉。以前常以上述组分加水混合，做成块状，烘干，但现在有膨化颗粒饲料出售.对于小鼠，每日的饲料在48g,大鼠在15-20g;豚鼠在1530g。兔在3080gkg天。注意他们的啮齿类动物行为,就是喜欢咬东西。因为它们的牙齿终生生长，于是它们要磨牙。这样，投予过多饲料它们也会浪费掉。兔虽属兔型目，但有类似啮齿目动物的行为。下图中所示是一些实验动物饲料配方的百分比（%）。B特殊饲料这里主要是指一些用于造模的饲料。1高脂饲料这可能是最

13、常用的一种造模饲料。主要原理是通过外源性胆固醇、甘油三酯的摄入形成高血脂、动脉粥样硬化动物模型。最常用的动物是大鼠、兔、金黄地鼠。也有用其它动物的，但通常以糊剂、乳剂灌胃来造模。下面我们来谈谈高脂饲料的配制。常用配方:猪油10%鸡蛋黄5%胆固醇12%丙基硫氧喀陡0.2%普通饲料82.883.8%另可酌加胆酸盐0.2%左右，维生素D3等。原理：猪油富含甘油三酯；鸡蛋黄是天然食物中含胆固醇最高的；丙基硫氧喀陡有助于成模，因甲状腺素促进胆固醇的分解，而丙基抑制其作用；胆酸盐主要是促进胆固醇的吸收；维生素D3主要是促进动脉粥样硬化形成。制法：胆固醇鳞片状，研细；丙基研细；二者充分混合。取鸡蛋煮熟,剥取

14、蛋黄，捏碎，吹干，研成细粉，与前二者混合好。如要加胆酸盐、维生素D3,亦将其混合好。然后以等量递增法将上述药料加入到普通饲料粉末中。再将猪油化开，喷洒在饲料粉末之中混匀。混好之后喷适量水为黏合剂，加到制粒机中制成棒状饲料。在此，特别提出等量倍增法。因上述造模药料与普通饲料的量相差悬殊，直接加入其中是难以混匀的。这样会造成以后动物摄入的造模的胆固醇，甘油三酯差异大，不利于实验。所谓等量递增法就是：将上述药料入差不多相等的普通饲料粉末充分混匀；得混合物后，再加与此混合物相等量的普通饲料混合，充分混匀；如此类推。比如：药料为200g,第一次混合后即为400g,第二次混合后为800g.这样就成倍地混合

15、好。因此，又称为等量倍增法。因为相等量的不同物质混合时，相互混入对方的机率最大，最容易混匀。学过药剂的朋友们是非常熟悉的，这在中药的散剂中就是这样做的。没学过这个方法的朋友要特别关注。目前有些饲料供应商称可以提供现成的高脂饲料。一则他们很多根本就是胡乱地加入其中的，极不均匀，严重影响实验。二则他们做的饲料中造模药的比例不一定符合你的要求。很少有人懂得等量倍增法的原理及实用价值。因为目前饲料行业中专业人士多不会在一线，而是做管理工作。做饲料的多是没有专业知识，而只是稍加培训甚至没有培训的普通工人。当然，等量倍增的做法很简单，关键是要有这样的专业意识。做此饲料时，最好全程跟踪，这样才会对实验结果心

16、中有数。在此，我一而再，再而三地强调等量倍增法配制饲料，就是为了站友们减少在此类实验中的误差。因为，有人问我，为什么他们的高脂组有些动物的血脂几乎跟正常组没有显著差异，而有的又高很多，标准差如此地大？我第一时间想到的就是饲料的配制是否有问题。如果饲料没配好，实验可能前功尽弃。因此，不厌其烦地说两句：高脂饲料要亲自配，且按要求、按科学规律配（等量倍增法）。饲料成形后，要摊开置通风处吹干，或以电风扇吹干。不要受热。在春夏之季，尤应注意。因其中含有脂肪油类，且因制饲料时要经过高温压制，放在一起易发热、生霉。有人置冰箱保存，实不妥。一则冰箱容量有限；二则饲料中的水分未尽，出冰箱后，冰化，更易生霉，且动物不是太喜欢