[医学]外周血细胞形态检验.ppt
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1、讲讲 授授 内内 容容 器材器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。操作操作 在玻片近一端1/3处,加一滴血液,握住另一张边缘光滑的推片,以3045角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。注意事项注意事项 血膜呈舌状,头、体、尾分明血膜呈舌状,头、体、尾分明 空气中晃动,尽快干燥;空气中晃动,尽快干燥;37恒温箱中促干恒温箱中促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小(涂片的厚薄、长度与血滴大小(1020l)与血片质量)与血片质量 1h内染色或在内染色或在1h内甲醇固定内甲醇固定 正确清洁玻片正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片;抗凝血或毛细血管血涂片;EDTA能阻止能阻止PLT聚
2、集聚集 抗凝血液抗凝血液4h内涂片内涂片 原理原理 瑞氏(瑞氏(Wright)染色法(经典染色法)染色法(经典染色法)瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理 吸附作用。吸附作用。试剂试剂 瑞氏染液瑞氏染液 瑞氏染料瑞氏染料 0.1 g 甲醇甲醇(AR)60mlpH6.8磷酸盐缓冲液(磷酸盐缓冲液(pH6.46.8)磷酸二氢钾(磷酸二氢钾(KH2PO4)0.3g 磷酸氢二钠(磷酸氢二钠(Na2HPO4)0.2g 加少量蒸馏水溶解,再加至加少量蒸馏水溶解,再加至1000ml。操作操作加瑞氏染液数滴,固定血膜约加瑞氏染液数滴,固定血膜约1min。
3、滴加约等量的缓冲液与染液混合,滴加约等量的缓冲液与染液混合,室温下染色室温下染色510min。用流水冲去染液用流水冲去染液,待干燥后镜检。待干燥后镜检。注意事项注意事项PH对细胞染色有影响。对细胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。未干透的血膜不能染色。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。不能先倒掉染液,用流水冲去。不能先倒掉染液,用流水冲去。血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。先在低倍镜下浏览全片,了解染色好坏和先在低倍镜下浏览全片,了解染色好坏和 细胞分布情况,观察有无异常细胞。细胞分布情况,观察有无异常细胞。选择涂
4、片体尾交界处染色良好的区域,在选择涂片体尾交界处染色良好的区域,在 油镜下计数油镜下计数100个白细胞,按其形态特征个白细胞,按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。血血 涂涂 片片 镜镜 检检 注意事项注意事项分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动,计数使不能重复和遗漏。城垛状迂回移动,计数使不能重复和遗漏。白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。分类见有核红细胞,不计入分类见有核红细胞,不计入100个白细胞内,以分类个白细胞内,以分类10
5、0个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告,并个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告,并注明所属阶段。注明所属阶段。除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在结果报嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况,注意有无寄生虫和其他异常所见。色及分布情况,注意
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- 医学 血细胞 形态 检验
