血清载脂蛋白A1 血清载脂蛋白B免疫透射比浊法测定法.docx

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1、血清载脂蛋白A1免疫透射比浊法测定法1 .实验原理免疫透射比浊终点测定法。使用抗ApoAl抗体和样品中的ApoAl进行抗原-抗体反应。反应完成后，用透射比浊法检测吸光度的变化反映ApoAI浓度。2 .标本：2. 1病人准备：12小时禁食。2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆。3 .标本存放：稳定性：1525C保存可稳定5天；28C保存可稳定2周；-20。C保存可稳定3个月；标本不可反复冻融。4 .标本运输：常温条件下保存运输。5 .标本拒收标准：标本细菌污染的标本。6 .实验材料6.1试剂申能APOAI测定试剂盒（货号：25171002101试剂1525ml;试剂2lX25ml）6.1.1试剂

2、组成试剂1（R1）：pH7. 5 100mmolLTris缓冲液聚乙二醇（PEG）表面活性剂，稳定剂适量试剂2（R2）：pH7. 5100mmolL适量Tris缓冲液羊抗人APoAl抗体（含稳定齐IJ）6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存试剂保存于28,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后放于仪器的冰箱中可以稳定30天。6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6. 1.5注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95gL）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂6.2校准品

3、：建议使用DiaSys公司提供的TruCalApoAl校准品对自动分析仪进行校准，校准稳定期：4周。具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6 .3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7 .仪器：奥林巴斯AU100O生化分析仪8 .操作步骤8 .1项目基本参数：参见AUlOOo生化分析仪项目测定参数.SOP文件9 .2仪器操作步骤：参见AUlOOO生化分析仪操作规程.SOP文件10 检验结果的判断与分析11 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程

4、.SOP文件。12 .计算方法：按照公司配套校准品使用要求，用3个不同水平的校准液，并以9gL氯化钠溶液为空白，经校准测定，仪器自动对校准品响应量通过合适的数学模型如LOgit/Log,拟合成校准曲线。校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。13 .参考值范围tsl女性：1.201.90gL男性：1.10-1.70gL参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。14 .临床意义载脂蛋白Al（APoAD是高密度脂蛋白（HDL）的主要结构蛋白，它可以去除细胞中的胆固醇，因此具有预防动脉粥样硬化的作用。流行病学研究表明以A

5、poAl表示的HDL水平与冠心病（CHD）的流行率呈负相关。在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病危险时，除检测脂蛋白（a）与载脂蛋白B之外，同时检测载脂蛋白Al能对脂类失调提供更多的信息，也可替代高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）检测。一些研究表明，当ApoB浓度上升（女性ApoBl.50gL,男性ApoB1.55gL）,而ApoAl浓度下降（女性ApoAl1.50gL,男性ApoBl.55gL）,而ApoAl浓度下降（女性Apoll.20gL,男性APOAkI.10gL）,对于预测CHD危险非常有用。14.操作性能14 .1线性范围：O.Ol2.50gL14.2精密度：精密度的评估是根据NeCLS推荐的标准方法，AUlOOO批内精密度小于3%,总精密度小于3%o用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20X(gL)S(gL)CV(%)天间精密度n=20（每天校）X