第2章色谱分析法基础1.ppt
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1、 第二章 色谱法引论Generalization of chromatograph analysis2.1 概述概述2.2 色谱流出曲线及有关术语色谱流出曲线及有关术语2.3 色谱基本理论色谱基本理论2.4 分离度分离度2.1 概述概述o一一 色谱法简介色谱法简介o二二 色谱发展历史色谱发展历史o三三 色谱的分类色谱的分类o四四 色谱法的特点色谱法的特点 经典的分离方法经典的分离方法:沉淀、蒸馏和萃取;沉淀、蒸馏和萃取;现代分析中,大量采用现代分析中,大量采用色谱和电泳分离色谱和电泳分离方法。迄方法。迄今为止,今为止,色谱方法是最为有效的现代分离分析手段色谱方法是最为有效的现代分离分析手段!2
2、.1 概概 述述 色谱法是一种色谱法是一种物理化学物理化学分离方法。将这种分离方分离方法。将这种分离方法与适当的法与适当的检测手段检测手段相结合,应用于分析化学领域,相结合,应用于分析化学领域,就是色谱分析法。就是色谱分析法。一、色谱法简介一、色谱法简介 色谱法早在色谱法早在1906年由俄年由俄国植物学家国植物学家MRswett(茨茨维特维特)使用使用CaCO3粉末作粉末作为为 ,石油醚作,石油醚作为为 ,玻璃管作玻璃管作为为 ,分离植物中,分离植物中色素时发现并命名的色素时发现并命名的“色谱色谱法法”(chromatography)色谱法是一种分离技术,其研究对象是复杂的混合物质。色谱法是一
3、种分离技术,其研究对象是复杂的混合物质。固定相固定相流动相流动相色谱柱色谱柱二、色谱法的历史二、色谱法的历史 俄国植物学家茨维特俄国植物学家茨维特Tsweet 首先将这种层析现象用于分离首先将这种层析现象用于分离植物色素红萝卜素、叶黄素和叶绿素植物色素红萝卜素、叶黄素和叶绿素A、B,并将这种方法,并将这种方法命名为色谱法命名为色谱法 液液-固色谱(是最先创立的色谱方法)固色谱(是最先创立的色谱方法)20年后(年后(1931)Kuhn(库恩库恩)为了证实蛋黄中的叶黄素)为了证实蛋黄中的叶黄素是植物叶黄素与玉米黄质的混合物,参考了是植物叶黄素与玉米黄质的混合物,参考了Tsweet 的论文的论文并采
4、用的色谱法进行其研究工作(并采用的色谱法进行其研究工作(吸附色谱)吸附色谱)1938年,年,Martin(马丁马丁)和)和Synge(辛格辛格)采用水分饱和)采用水分饱和的硅胶为固定相,以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基的硅胶为固定相,以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基氨基酸并且提出了色谱塔板理论氨基酸并且提出了色谱塔板理论 分配色谱分配色谱 1951年,年,Martin 和和James采用气体作为流动相,以自动滴采用气体作为流动相,以自动滴定仪作为检测器分析脂肪酸定仪作为检测器分析脂肪酸 气相色谱法气相色谱法。建立。建立形成色形成色谱学理论中有着重要地位的塔板理论和谱学理论中有着重要地位的塔
5、板理论和Van Deemter方程,方程,以及保留时间、保留指数、峰宽等概念。以及保留时间、保留指数、峰宽等概念。1952年,年,A.J.P.Martin和和 R.L.M.Synge获得了诺贝尔化学奖。获得了诺贝尔化学奖。在他们获得诺贝尔奖的论文中还指出在他们获得诺贝尔奖的论文中还指出“采用气体代替液体采用气体代替液体作为流动相分离各类化合物的可能性是存在的。作为流动相分离各类化合物的可能性是存在的。”“如果如果流动相用气体来代替,对分离更有好处流动相用气体来代替,对分离更有好处”,“使用非常细使用非常细的颗粒填料和柱的两端施加较大的压差,应能得到较小的的颗粒填料和柱的两端施加较大的压差,应能
6、得到较小的理论塔板商理论塔板商”1957年,年,Golay又提出了使用毛细管柱代替填充柱可获得又提出了使用毛细管柱代替填充柱可获得极高的分离效率极高的分离效率毛细管气相色谱法毛细管气相色谱法 从此,气相色谱法得以蓬勃发展。气相色谱学的诞生从此,气相色谱法得以蓬勃发展。气相色谱学的诞生及其获得广泛的应用使色谱学逐渐成为分析化学的一个重及其获得广泛的应用使色谱学逐渐成为分析化学的一个重要分支学科要分支学科1960年代,为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质,年代,为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质,气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。
7、1960年代年代末末科克兰科克兰等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了等人开发了世界上第一台高效液相色谱仪,开启了高效液相色谱高效液相色谱的时代。的时代。1971年科克兰等人出版了年科克兰等人出版了液相色谱的现代实践液相色谱的现代实践一书,一书,标志着高效液相色谱法标志着高效液相色谱法(HPLC)正式建立。正式建立。1937-1972年,年,15年中有年中有12个个Nobel奖是有关色谱研究的!奖是有关色谱研究的!三、色谱的分类三、色谱的分类1.1.色谱过程中两相的物理状态分类色谱过程中两相的物理状态分类 2.2.色谱分离过程的作用原理分类色谱分离过程的作用原理分类 3.3.固定相的使用
8、分类固定相的使用分类1.1.色谱过程中两相的物理状态分类色谱过程中两相的物理状态分类3)超临界流体色谱超临界流体色谱(SFC)1)气相色谱气相色谱(GC):气气固色谱固色谱(GSC)、气、气液色谱液色谱(GLC)2)液相色谱液相色谱(LC):液液固色谱固色谱(LSC)、液、液液色谱液色谱(LLC)2.2.色谱分离过程的作用原理分类色谱分离过程的作用原理分类吸附色谱法吸附色谱法 adsorption chromatography分配色谱法分配色谱法 partition chromatography离子交换色谱法离子交换色谱法 ion exchange chromatography空间排阻色谱法空
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- 色谱 分析 基础