氨基酸自动分析仪.ppt
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1、XO3-Na+H3N+CHRCOOHXSO3-H3N+CHRCOOH +Na+PH减小PH增大PH小于氨基酸的等电点时,氨基酸带正电荷,可被磺酸基团吸引,随着PH升高或离子强度增大,氨基酸所带正电荷减少,吸引力下降乃至消失而被洗脱下来。衍生方式:衍生方式:1、柱前衍生法:、柱前衍生法:将将AA混合物先衍生后,在用反相混合物先衍生后,在用反相 分配分配色谱法分离,测定其紫外吸收或产生的色谱法分离,测定其紫外吸收或产生的荧光强度。荧光强度。2、柱后衍生法:、柱后衍生法:将将AA混合物用离子交换色谱法分离,在混合物用离子交换色谱法分离,在把分离后的氨基酸衍生为具有可见吸收把分离后的氨基酸衍生为具有可
2、见吸收或产生荧光的物质,然后测定。或产生荧光的物质,然后测定。(1)茚三酮法)茚三酮法多数氨基酸与水合茚三酮在弱酸条件下共多数氨基酸与水合茚三酮在弱酸条件下共热,引起热,引起AA的氧化脱氨、脱羧反应,水的氧化脱氨、脱羧反应,水合茚三酮与氨合还原茚三酮反应,生成紫合茚三酮与氨合还原茚三酮反应,生成紫色色DYDA,最大吸收,最大吸收570nm(脯氨酸与羟(脯氨酸与羟脯氨酸例外,生成黄色化合物,最大吸收脯氨酸例外,生成黄色化合物,最大吸收440nm)。)。最后根据吸光度与峰面积的关系定性定量最后根据吸光度与峰面积的关系定性定量分析。分析。洗脱装置色谱柱(控温)混合室反应器检测器工作站衍生液(1)输液
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