版本A4修改日期20211DNS试剂NYT法.docx

《版本A4修改日期20211DNS试剂NYT法.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《版本A4修改日期20211DNS试剂NYT法.docx（3页珍藏版）》请在优知文库上搜索。

1、版本：A4修改日期：2021.12.11DNS试剂（NY/T法）产品简介：植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质形状，常以糖含量作为重要指标，单糖和某些寡糖（如麦芽糖）含有游离的醛基或酮基，具有还原性，属于还原糖；多糖和蔗糖等属于非还原糖，可以利用多糖能被酸水解为单糖的特性通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。1.eageneDNS试剂（NY/T法）是植物总糖和还原糖检测（硝基水杨酸法）的成分之一,其检测原理是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸35-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系，在540nm处测定棕红色物质的吸光度，该吸光

2、度值与还原糖含量呈线性关系，利用比色法和标准曲线测得样品中的还原糖和总糖的含量。该试剂仅用于科研领域不适用于临床诊断或其他用途。产品组成：编号名称j_TC0030TC0030StorageDNS试剂（NY/T法）100mI500ml4避光使用说明书1份自备材料：1、蒸储水2、50ml离心管3、离心机4、水浴锅或恒温箱5、分光光度计6、盐酸溶液、氢氧化钠溶液操作步骤（仅供参考）：1、还原糖的提取：称取植物样品053g,剪碎，加入蒸储水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸储水冲洗研磨器23次，洗出液也转移至该容器。50。C水浴30min,并不时搅拌，以便还原糖彻底浸出。将沉淀和浸出液转

3、移至50ml离心管，4000g离心5min0留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸储水，混匀，再次4000g离心5min0留取上清液，将2次获得的上清液合并,用蒸储水定容至100m1（提取液），混匀，作为还原糖待测液。2、总糖的水解和提取：称取植物样品053g,剪碎，加入蒸储水约3ml匀浆，转移至烧杯或三角瓶中，用12ml蒸储水冲洗研磨器23次，洗出液也转移至该容器。向容器中加入IOmI6M盐酸溶液，搅拌均匀，煮沸30min,并不时搅拌。取2滴滴加于载玻片上，滴加1滴显色液，检查水解是否完全，如已经水解完全则不显示蓝色。水解完毕后，冷却至室温，加入6M氢氧化钠溶液，使溶液PH至7.4左右，用蒸储水

4、定容至100mI,混匀，4000g离心5min或过滤,获得上清或滤液。取上清或滤液10ml,用蒸储水定容至IoomI,成稀释10倍的总糖水解液(提取液)，取Iml总糖水解液,测定其还原糖的含量。3、制作葡萄糖标准曲线取干净离心管或试管,按下表进行操作,以0号调零检测54Onm处吸光度，以吸光度为纵坐标，各标准浓度(mgml)为横坐标作图得标准曲线。加入物质(ml)012345Glu标准(Img/ml)00.20.40.60.81.0蒸储水1.00.80.60.40.20DNS试剂2.02.02.02.02.02.0沸水浴中准确煮沸5min,取出，自来水冷却至室温。蒸储水9.09.09.09.0

5、9.09.0相当于葡萄糖量00.20.40.60.81.04、还原糖测定：取制备好的还原糖提取液或者总糖水解液Iml,分别加入DNS试剂2ml,其余操作同标准曲线的操作，54Onm处测定各管的吸光度。计算：还原糖的百分含量：还原糖含量()=(CV)(mVs)100总糖的百分含量：总糖含量()=(CV)(mVs)100100.9式中：C=从标准曲线查的糖量(mg)VT=提取液的体积(ml)m=植物样品的质量(mg)VS=测定时用的样品体积(ml)注意事项：1.该试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降，尽量避光保存。2、稀释盐酸和氢氧化钠溶液时，应/卜心操作，避免伤人。3、一般市售的浓盐酸摩尔数约为

6、11.6M,应稀释至6M后使用。4、待测样本如不能及时测定,应置于28。C保存，3天内稳定。5、如果样品还原糖浓度过高，应用蒸储水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。6、总糖计算公式在测定干扰杂质很少、还原糖含量相对总糖含量很少时使用，9是为了从测定出的总糖水解成单糖中，扣除水解时所消耗的水量。有效期：12个月有效;室温运输，4。C保存。相关产品：产品编号产品名称DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液DP0013GUS染色液同用型）DZ2011环保浸蜡月兑蜡透明液NROOOlDEPC处理水(0.1%)PS0013RlPA裂解液（强）TC0713葡萄糖检测试剂盒（GoD-PC）D比色法）TO1013丙二醛（MDA）检测试剂盒（TBA比色法）