荧光分析法在药物分析中的应用.ppt
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1、概述:概述:发光分析是分子发光光谱分析的简称化学发光分析(包括生物发光)化学发光分析(包括生物发光)分子荧光分析分子荧光分析分子磷光分析分子磷光分析荧光分析法在药物分析中的应用荧光分析法在药物分析中的应用 2020世纪世纪7070年代以来,特别是近年来相继出现的各种灵敏度高的荧年代以来,特别是近年来相继出现的各种灵敏度高的荧光分析法已有效地用于药物制剂以及生物体液中药物的分析。如光分析法已有效地用于药物制剂以及生物体液中药物的分析。如同同步扫描荧光技术步扫描荧光技术可用于违禁品中苯丙胺和吗啡加奎宁的测定;可用于违禁品中苯丙胺和吗啡加奎宁的测定;荧光荧光偏振免疫分析法偏振免疫分析法可用于血清中的
2、庆大霉素、地答新、茶叶碱、五巴可用于血清中的庆大霉素、地答新、茶叶碱、五巴比妥、苯巴比妥等多种药物的检测,还可进行烧伤患者体内萘替米比妥、苯巴比妥等多种药物的检测,还可进行烧伤患者体内萘替米星的药代动力学研究;星的药代动力学研究;特异性荧光偏振免疫法特异性荧光偏振免疫法可用来监测肾移植后可用来监测肾移植后环孢素环孢素A A的全血浓度;的全血浓度;荧光猝灭法荧光猝灭法用来测定苦参碱和氧化苦参碱的含用来测定苦参碱和氧化苦参碱的含量;固体表面荧光测定法用于血清中茶叶碱,以及其它多种抗菌药、量;固体表面荧光测定法用于血清中茶叶碱,以及其它多种抗菌药、抗气喘病药、抗惊风病药等的临床荧光分析;抗气喘病药、
3、抗惊风病药等的临床荧光分析;电解荧光光度法电解荧光光度法测定测定片剂中卡马西平的含量等等。其中,片剂中卡马西平的含量等等。其中,荧光探针技术荧光探针技术已经发展成为借已经发展成为借助荧光显微镜在分子水平上进行实时检测的重要手段。这种技术灵助荧光显微镜在分子水平上进行实时检测的重要手段。这种技术灵敏度高,可视性强,而且对研究的生物大分子或细胞干扰少,因此敏度高,可视性强,而且对研究的生物大分子或细胞干扰少,因此得到广泛应用。得到广泛应用。荧光分析法的特征:荧光分析法的特征:荧光发射光谱的形状与发射波长无关荧光发射光谱的形状与发射波长无关斯托克位移斯托克位移 在溶液光谱中观察到的荧光发射光的波长总
4、是大于激发光的波长。改变不同的激发波长,同一荧光物质的发射光谱形状不变。灵敏度高灵敏度高 一般比紫外-可见吸收光谱法高2-4个数量级。操作简单操作简单 取样量少、重现性好。一 该物质必须具有与所照射光线相同频率的吸收结构;二 该物质吸收了与其本身特征频率相同的能量之后,必须具有一定的荧光量子产率。常规的荧光分析法可分为常规的荧光分析法可分为直接荧光测定法直接荧光测定法和和间接间接荧光测定法荧光测定法。直接荧光测定法是利用物质自身发射的。直接荧光测定法是利用物质自身发射的荧光进行定量测定,而物质分子自身产生荧光必须具荧光进行定量测定,而物质分子自身产生荧光必须具备两个条件备两个条件:几种常用于药
5、物分析的荧光分析法:几种常用于药物分析的荧光分析法:直接荧光分析法适用于自身能产生荧光的物质,便可直接荧光分析法适用于自身能产生荧光的物质,便可通过药物的荧光强度变化来测定其浓度和含量。因荧光性通过药物的荧光强度变化来测定其浓度和含量。因荧光性质与溶液的质与溶液的pH值有关,所以研究体系荧光强度的测定须在值有关,所以研究体系荧光强度的测定须在适宜的介质溶液中进行,适宜的介质溶液中进行,pH对体系荧光强度的强弱影响甚对体系荧光强度的强弱影响甚大。已用于直接荧光分析法测定的药物有盐酸洛呱丁胺、大。已用于直接荧光分析法测定的药物有盐酸洛呱丁胺、双水杨酸等。双水杨酸等。直接荧光法直接荧光法 对于有些药
6、物的测定可以利用其对某一特定的有荧光对于有些药物的测定可以利用其对某一特定的有荧光性的体系的荧光淬灭作用对其进行定量分析和测定。庞志性的体系的荧光淬灭作用对其进行定量分析和测定。庞志功等建立了测定苦参碱和氧化苦参碱的荧光分析方法。荧功等建立了测定苦参碱和氧化苦参碱的荧光分析方法。荧光淬灭法还用于对梭基苯丙酮酸、司帕沙星、甲硝哇等药光淬灭法还用于对梭基苯丙酮酸、司帕沙星、甲硝哇等药物的含量进行分析。物的含量进行分析。荧光淬灭分析法荧光淬灭分析法 日常生活中,日常生活中,大部分药物没有荧光性大部分药物没有荧光性。衍生化荧光分。衍生化荧光分析就是借助化学反应将待测的某种药物接上某种特定的化析就是借助
7、化学反应将待测的某种药物接上某种特定的化学基团,去掉某种化学基团,或者改变某种特定基团,己学基团,去掉某种化学基团,或者改变某种特定基团,己达到改变待测药物的物质结构,从而改变待测药物的荧光达到改变待测药物的物质结构,从而改变待测药物的荧光特性之目的,提高待测物灵敏度的分析方法。特性之目的,提高待测物灵敏度的分析方法。衍生化荧光分析法衍生化荧光分析法 有些有机配体与金属离子形成的配合物能产生刚性平面有些有机配体与金属离子形成的配合物能产生刚性平面结构,这种结构的物质能发射荧光。而我们平常用的药物很结构,这种结构的物质能发射荧光。而我们平常用的药物很多都含有有机配体,所以可以通过改变有机配体的结
8、构而达多都含有有机配体,所以可以通过改变有机配体的结构而达到改变药物结构的目的。这些配体绝大多数为芳香族化合物:到改变药物结构的目的。这些配体绝大多数为芳香族化合物:例如例如-OH,-NH2,-SH,-COOH,-OR,-O,-NR3等,等,这些官能团能与金属离子形成稳定的五元或六元环配合物。这些官能团能与金属离子形成稳定的五元或六元环配合物。利用金属络合的反应进行衍生利用金属络合的反应进行衍生 氧化还原反应是还原剂将电子转移给氧化剂,其结果是有氧化还原反应是还原剂将电子转移给氧化剂,其结果是有机物质分子结构发生改变,使其产生荧光或荧光强度增强。机物质分子结构发生改变,使其产生荧光或荧光强度增
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- 荧光 分析 药物 中的 应用