α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)测定标准操作规程.docx
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1、。-羟丁酸脱氢酶(Q-HBDH)测定标准操作规程1.检验原理:(酶学速率法)羟丁酸脱氢酶催化酮丁酸还原为羟基丁酸,在此过程中,还原型辅酶I(NADH)被氧化为氧化型辅酶I(NAD+),通过在340nm处监测吸光度下降的速度,即可计算出样本中a-羟丁酸脱氢酶的活力。A-酮丁酸+NADH+H+3建J邀脱和a-羟基丁酸+NAD+2.试剂主要组成成分组成成分浓度Rl三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH6.1)1OOmmo1/L酮丁酸3.5mmolLR2三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.3)1OOmmo1/L还原型辅酶I(NADH)Immo1/L3.样本要求:静脉采血。新鲜无溶血血清。28保48小时,-20C保存
2、7天,样本不可反复冻融!样本中抗坏血酸含量W0.3g/L、胆红素含量0.4gL血红蛋白含量W5.Og/L、乳糜含量W5.Og/L对检测结果基本无影响。4.检验方法;仪器法(详见DF-603Db600标准操作规程)5.参考范围:样本参考范围(U/L)血清72-1826.检验结果的解释:6. 1样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本.建议最大稀释不超过10倍。7. 2.单位换算:ukatL=UL16.671037.检验方法的局限性7.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊,或以水空白在340nm处吸光度小于0.800时不能使用。8.
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