BS&BA液体菌剂生产技术规程.docx

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1、BS&BA液体菌剂生产技术规程1范围本文件规定了BS&BA液体菌剂产品的原辅料要求、生产环境要求、生产技术管理、质量检验、包装、运输、贮存、档案管理、质量追踪的要求。本文件适用BS&BA液体菌剂的生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T19541饲料原料豆粕GB1353玉米GB32449饲料添加剂硫酸镁GB34468饲料添加剂硫酸锦GB1886.214食品安全国家标准食品添加剂碳酸钙GB34458饲料添加剂磷酸氢二钾GB3

2、4470饲料添加剂磷酸二氢钾GB/T1250极限数值的表示方法和判定方法GB/T8170数值修约规则GB20287农用微生物菌剂NY883农用微生物菌剂生产技术规程T/GTM001农用微生物菌剂工业化生产标准3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1BS&BA液体菌剂(BS&BALiquidbacterialagent)BS&BA液体菌剂商品名为“菌绿通”，由枯草芽抱杆菌(BS)、解淀粉芽抱杆菌(BA)单独纯种发酵并复配而成，具有促生、防病、增产、提效功能的速效农用微生物液体菌剂产品，其田间实验结果证明，该产品对水稻、玉米、大豆、小麦等农作物及棉花、辣椒、油菜等经济作物都有很好的促生长和防

3、病效果。4原辅料要求4.1豆粕豆粕质量应符合GB/T19541粗蛋白含量在43.0%以上的规定，豆粕经除尘除杂后粉碎成过40目筛的粉末后使用。4.2玉米粉玉米质量应符合GB1353三等以上的规定，玉米经除尘除杂后粉碎成过40目筛的粉末后使用。4.3硫酸镁硫酸镁质量应符合GB32449的规定。4. 4硫酸镒硫酸镒质量应符合GB34468的规定。5. 5碳酸钙碳酸钙质量应符合GB1886.214轻质碳酸钙的规定。6. 6磷酸氢二钾磷酸氢二钾质量应符合GB34458的规定。7. 7磷酸二氢钾磷酸二氢钾质量应符合GB34470的规定。5生产环境要求8. 1生产环境和生产车间应当符合NY/T883相关规

4、定5.2原料库/成品库应满足阴凉、通风、干燥、避免阳光直射的要求。5.3生产设备：种子罐、主发酵罐、配料罐、空压机、蒸汽锅炉、复配罐、灌装线的生产能力大小应能满足生产需要。6生产技术管理6.1菌种所用菌种分别为枯草芽抱杆菌、解淀粉芽抱杆菌，纯菌种单独发酵。9. 2菌种培养6.2.1凡用于菌种培养的器皿要经彻底清洗和灭菌。克氏瓶灭菌前须配上棉塞，并用防潮纸包扎管口。6.2.2新配制并经灭菌的克氏瓶斜面培养基，应在3032C条件下培养24小时，检查确无污染方可使用。6.2.3取出冰箱中干燥保存的菌种，在无菌条件下移接克氏瓶斜面，于30C条件下培养5天，待菌株都形成芽抱后可采用。6.2.4菌株筛选纯

5、化，每年进行一次筛选易产芽抱的菌株。6.3发酵生产6.3.1发酵前消毒在生产前发酵车间应进行紫外消毒12小时。6.3.2一级种子罐培养6.3.2.1种子罐使用前应进行121C,30分钟的空消处理。6.3.2.2种子罐空气过滤器消毒，滤器压力保持在0.100.12MPa,保压30分钟。6.3.2.3按照种子罐生产处方进行配料（实际装液量70%）,并对种子罐进行高温蒸汽消毒，控制消毒温度121C,消毒30分钟，保温完成后开启冷水进行降温至32C左右待用，降温的同时通入无菌空气使得罐压力保持在005MPa以上。6.3.2.4灭菌效果检查采用NY/T883规定的染色观察法。6.3.2.5菌种悬液制备，

6、把提前培养好的克氏瓶斜面用无菌蒸储水洗下，制备成菌种悬液，取适量菌悬液经结晶紫染色，显微镜观察无杂菌后方可做下一步使用，6.3.2.6合格菌悬液经80C水浴处理15分钟后备用。6.3.2.7种子罐接种，火焰保护下接种。6.3.2.8种子罐培养，通入无菌空气，调整进风量，开启搅拌，维持培养温度在3005C培养15小时左右（PH回升），取样观察菌体形态整齐，着色均匀，无芽抱、无杂菌污染，转移至发酵罐进行发酵培养。6.3.3发酵罐发酵6.3.3.1发酵罐使用前应进行121C,30分钟的空消处理。6.3.3.2发酵罐空气过滤器消毒，过滤器蒸汽压力保持在0.100.12MPa,启保压30分钟。6.3.3

7、.3按照发酵罐生产处方进行配料（实际装液量W70%）,并对发酵罐进行高温蒸汽消毒，控制消毒温度121,消毒30分钟，保温完成后开启冷水进行降温至32C左右待用，同时向罐内通入无菌空气，使得罐内压力保持在005MPa以上。6.3.3.4灭菌效果检查采用NY/T883规定的染色观察法。6.3.3.5移种管道消毒，移种前先通过蒸汽把种子罐和发酵罐之间连接的移种管道消毒60分钟，6.3.3.6发酵罐移种及发酵，利用压差的方法，用无菌空气把培养好的种子从种子罐经过消毒的移种管道压入发酵罐（接种量为10%）,调整发酵温度为300.5,通入无菌空气，调整进风量，开启搅拌进行发酵培养，24小时后定期取样，镜检

8、菌体生长情况及芽抱形成情况，当芽抱成熟率在90%以上即可放罐。6.4复配6.4.1复配罐及发酵罐与复配罐连接的管道要经过蒸汽消毒处理。6.4.2利用无菌空气把培养好的发酵液从发酵罐中压入复配罐，加入需要的辅料后搅拌均匀，在复配罐中保压待检。7产品质量检验从复配罐中接取适量样品，按照GB20287中规定进行检验。8包装、标识和贮存8.1 经检验合格的复配菌液经全自动灌装机和贴标机生产线自动灌装和贴标签，检查灌装后每瓶菌剂的密封性，产品在确保密封严密，没有渗漏的情况下进入装箱打包工序，最后入库存放。8.2 BS&BA液体菌剂的包装、标识、运输和贮存应符合NY/T798中第7章的规定。菌液采用塑料瓶

9、装,有两种包装规格：一种规格为每瓶灌装液100mL80瓶菌液装入一个纸箱，作为一件成品存放；另一种规格为每瓶灌装500ml,30瓶菌液装入一个纸箱，作为一件成品存放。8.3 在包装的过程中，未包装的液体产品应注意罐内压力不应掉零，防止杂菌进入。8.4 包装好的菌剂产品于干燥、通风、阴凉处储存。9档案管理按照NT/T883规定执行。10质量追踪按照NT/T883规定执行。附录A（资料性）产品外观及技术指标A.1产品外观（感官）棕黄色酱油状液体，带有腥臭味。A. 2产品技术指标项目状态有效活菌数（CfU）亿/ml霉菌杂菌数/（个/ml）杂菌率/%pH值粘度/CPS保质期/月2附录B（资料性）菌体形态剂、型液体 2. O 3.0X106 10.06. 06. 36.312B. 1枯草芽抱杆菌种子罐移种时形态B.2枯草芽泡杆菌发酵罐放罐时芽抱形态B.3解淀粉芽抱杆菌种子罐移种时形态B.4解淀粉芽抱杆菌发酵罐放罐时芽抱形态