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1、微生物实验微生物实验1-1实验一实验一 显微镜的使用及微生物形态观察显微镜的使用及微生物形态观察1-21-3显微镜放大倍数显微镜放大倍数 = 目镜放大倍数目镜放大倍数 物镜放大倍数物镜放大倍数物镜上的标识:物镜上的标识: 1 .25 (0.65、0.25) 100(40、10) 160 / 0.17 160 / 0.17 数值孔径数值孔径 放大倍数放大倍数 镜筒长镜筒长 盖玻片厚度盖玻片厚度 数值孔径:数值孔径: N.A. = nN.A. = ns i n / 2 s i n / 2 n n 玻片和物镜之间的折射率。玻片和物镜之间的折射率。 光线最大射入角。光线最大射入角。 分辨率(最大可分辨
2、距离)分辨率(最大可分辨距离)/ N.A. N.A. 波长波长 1-4 2. 2. 显微镜的使用显微镜的使用 低倍镜的使用低倍镜的使用 (1 1)双手取出显微镜置于实验台上,接上电源,打开开)双手取出显微镜置于实验台上,接上电源,打开开关,调节合适光量。关,调节合适光量。 (2 2)转动转换器,将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜)转动转换器,将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜筒间的距离。筒间的距离。 (3 3)将载玻片放在载物台上夹住,移动观察对象于圆孔)将载玻片放在载物台上夹住,移动观察对象于圆孔正中。正中。 (4 4)侧视物镜,转动粗调将载物台上移,至载玻片距物)侧视物镜,转动粗调将载物台上移
3、,至载玻片距物镜头约时停止。镜头约时停止。 (5 5)双眼向目镜里观察,同时旋转粗调节器使载物台缓)双眼向目镜里观察,同时旋转粗调节器使载物台缓慢慢下移下移,若,若标本显出但不清晰,可用细调节器调至清晰。若标本显出但不清晰,可用细调节器调至清晰。若粗调旋转太快,超过焦点没有看到标本,则必须重复(粗调旋转太快,超过焦点没有看到标本,则必须重复(4)、)、 (5)步骤。不能在眼睛观察目镜的同时旋转粗调,以防物镜与步骤。不能在眼睛观察目镜的同时旋转粗调,以防物镜与载玻片相碰撞,造成损坏。载玻片相碰撞,造成损坏。1-5 高倍镜的使用高倍镜的使用 在用低倍镜找到观察目标后,若需要进一步放大观察,在用低倍
4、镜找到观察目标后,若需要进一步放大观察,将其移到视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方,将光将其移到视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方,将光量调大一点。若标本不清晰,用细调上下转动使之清晰。量调大一点。若标本不清晰,用细调上下转动使之清晰。(此时不再动粗调此时不再动粗调) 显微镜的维护显微镜的维护 ()将载物台降至最低,取下标本片。()将载物台降至最低,取下标本片。 ()将光量调至最小,关上电源。()将光量调至最小,关上电源。 ()用镜头纸先檫目镜、物镜,再擦显微镜其它部分。()用镜头纸先檫目镜、物镜,再擦显微镜其它部分。 ()将显微镜放入镜箱,还原。()将显微镜放入镜箱,还原。1-6(二
5、)微生物形态的观察(二)微生物形态的观察 1. 用低倍镜和高倍镜观察用低倍镜和高倍镜观察颤藻、颤藻、曲霉、青霉、酵母菌、放线菌、曲霉、青霉、酵母菌、放线菌、星藻示范片。星藻示范片。 2. 画出微生物形态图,并标明画出微生物形态图,并标明显微镜的放大倍数。显微镜的放大倍数。10 10 1010 颤藻颤藻2-1实验二实验二 活性污泥生物相的观察活性污泥生物相的观察2-2 三三. 实验内容实验内容2-3测微尺示意图测微尺示意图镜台测微尺及其中央部分的放大目镜测微尺校正目镜测微尺2-42-5 四四.实验结果实验结果 1.低、高倍镜下目测微尺每格的长度。低、高倍镜下目测微尺每格的长度。 2.画出画出23
6、种污泥中所观察到的生物形态图。种污泥中所观察到的生物形态图。标明名称、放大倍数和微生物的大小。标明名称、放大倍数和微生物的大小。 3.和微生物的大小。和微生物的大小。3-1实验三实验三 微生物的染色微生物的染色二染色原理和油镜的工作原理二染色原理和油镜的工作原理DC3BAABCD211油镜加镜油的原理1空气 2玻片 3油镜透镜 4镜油3-23-33-43-5四实验内容四实验内容3-63-7 五实验结果五实验结果 观察两种细菌的形态和颜色,绘出油镜下观察两种细菌的形态和颜色,绘出油镜下细菌形态图,说明革兰氏染色的结果。细菌形态图,说明革兰氏染色的结果。 六思考题六思考题4-1实验四微生物的计数实
7、验四微生物的计数(显微镜直接计数法)(显微镜直接计数法)4-2 三原理三原理 1. 血球计数板计数原理血球计数板计数原理血球计数板正面结构图计数室放大图4-3 计数:计数: 数出数出5个中方格中的总菌数个中方格中的总菌数A,若菌液的稀释,若菌液的稀释倍数为倍数为B,则计算公式如下:,则计算公式如下:)(个总菌数mlBAB/3200010165A4)(个总菌数mlBABA/50000102554 四四. 实验内容实验内容4-4 2. 酵母菌液的计数酵母菌液的计数4-5 五五. 结果记录结果记录1. 各中方格中菌数二室12345AB菌数/ml 平均值第一室1第二室15-1实验五活性污泥不同微生物种群实验五活性污泥不同微生物种群的分离培养与鉴别的分离培养与鉴别 二二. 实验器材实验器材5-2 三三. 实验内容实验内容5-33. 培养基的制备培养基的制备6-1(二)微生物的分离、培养及形态观察(二)微生物的分离、培养及形态观察1. 平板划线分离法平板划线分离法6-2 样品 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-66-43菌落形态特征的观察菌落形态特征的观察 4微生物个体形态观察微生物个体形态观察 5. 斜面接种技术斜面接种技术三三. 思考题:思考题: