接骨木叶斑病病原菌分离纯化.docx

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接骨木叶斑病病原菌分离纯化对接骨木病害标本进行病原菌的分离纯化，初步认为采集病害标本为两种病害，分别为白菜软腐病和黑腐病，查阅文献病原由分别为野油菜黄单胞杆菌野油菜黑腐病致病变种（XanthomonasCumpestrisp.cam）estns）和欧氏杆菌属细菌（ErwiniaCarOIovoraPV.Cam1.owra）,具体内容如下：1材料与方法1.1 材料接骨木病叶，2016年采自1.2 分离方法采用组织分离法，选取病理明显的叶片，在无菌操作条件下，以75%乙醇浸泡30s后，用无曲水冲洗3次后放入0.11.升汞中浸泡5min,再用无的水冲洗4次。将经过表面消毒的叶片，用无菌液纸吸干水分，在其病健交接位置切取0.5CmXO.5Cm的组织块，将其接种于9cm直径的马铃慧葡萄做琼脂培养基（PDA）平板上，25C恒温培养箱中光照培养3-5d0将分离得到的曲落接种于PDA上纯化，并将纯化得到的菌株置于PDA斜面中，4C低温保存。1.3 致病性测定采用伤口离体接种法，即剌伤接种部位再进行接种.2结果与分析2.1 症状观察接骨木病症症状，2.2 病原菌的分离纯化按骨木原有病害：费点病（壳针范）灰斑病（尾胞菌）