健胃补脾汤抗小鼠乙醇性胃黏膜损伤的作用.docx

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1、健胃补脾汤抗小鼠乙醇性胃黏膜损伤的作用健胃补脾汤抗小鼠乙醇性胃黏膜损伤的作用作者：林辉1.徐倩1,王唯2,王春英1,许凝1,刘芳1,刘红1,邵玲1,倪彩丽3作者单位：1250109山东济南，山东协和学院护理学院2310053浙江杭州，浙江中医药高校3250014山东济南，济南军分区干休所卫生所【摘要】目的探讨健胃补脾汤对乙醇所致小鼠胃黏膜损伤的爱护作用及其机制。方法将健康昆明小白鼠120只，随机分成5组：正常比照组、模型比照组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组。中药低、中、高剂量组分别以3m1.kg鼠重、6m1.kg鼠重、12m1.kg鼠重健胃补脾汤水煎剂灌胃，之后再以8m1.kg鼠重

2、25%乙醇溶液灌胃；模型比照组以8m1.kg鼠重25%乙醇溶液灌胃；正常比照组以8m1.kg鼠重生理盐水灌胃。以上各组按上述给药方法每日1次，连续给药7天。于第6天给药结束后，禁食不禁水24ho末次给药后2h,分别测定各组的血清中一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)的含量，并在光学显微镜下视察小鼠胃黏膜组织学变更，以评价药物对胃黏膜损伤的预防爱护效果。结果血清中NO含量，模型比照组与各中药治疗组血清NO含量均显著低于正常比照组，且具有统计学意义；中药低剂量组血清NO含量高于模型比照组，但不具有统计学意义；中药中剂量组血清NO含量高于模型比照组，且具有统计学意义：中药高剂量组血清NO含量显

3、著高于模型比照组，且具有统计学意义；各中药治疗组之间，中药低剂量组与中药中剂量组、中药高剂量组存在统计学意义；中药中剂量组与中药高剂量组之间不存在统计学意义。血清中PGE2含量，模型比照组与各中药治疗组血清PGE2含量均显著低于正常比照组，且具有统计学意义；中药低剂量组血清PGE2含量高于模型比照组，但不具有统计学意义；中药中剂量组与高剂量组血清PGE2含量高于模型比照组，且具有统计学意义。各中药治疗组之间，中药低剂量组与中药中剂量组，以及中药中剂量组与中药高剂量组之间不存在统计学意义，中药低剂量组与中药高剂量组之间存在统计学意义。光镜也显示中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组的损伤程度及

4、炎症反应较模型比照组明显减轻。结论健胃补脾汤对乙醇所致的小鼠胃黏膜损伤有肯定的预防爱护作用，其爱护作用是通过增加血清NO和PGE2,从而舒张血管，增加胃林膜血流量来实现的。【关键词】健胃补脾汤；小鼠；乙醇性胃黏膜损伤；血清N0;血清PGE2急性胃黏膜病变系指机体在严峻创伤、感染、休克等应激状态下，发生以胃黏膜损害为主的病理变更和上消化道出血为特征的临床病征1。在正常生理状态下，胃黏膜的屏障作用能抵挡各种外源性和内源性损伤物质的攻击，维持胃腔与胃黏膜内氢离子梯度状态。而在攻击因子的刺激或应激状态下，将会导致胃黏膜屏障破坏,如乙醉在胃内经乙醉脱氢酶作用可被氧化成乙醛而损伤胃黏膜，乙醇可影响胃酸分泌

5、、引起胃组织产生损伤性介质使胃黏膜损伤性因素增加,损伤胃黏膜屏障、削减胃黏膜爱护性物质含量2,30临床主要运用H2受体拮抗剂或质子泵抑制剂抑制胃酸分泌，或具有躺膜爱护作用的药物如硫糖铝作为预防措施。但有相当一部分患者或者症状无明显改善，或者须要长期服药，停药后症状易熨发，且存在副作用大、作用单一等缺点。而中医中药防治胃黏膜损伤有其F1.身特点及优势，可多靶点、多层次、多途径爱护胃黏膜。近年来很多学者在此领域做了大量探讨工作，发觉并证明很多中药单味药及梵方制剂具有明显的胃黏膜爱护作用。常江4通过对大鼠乙醇性急性胃黏膜损伤的探讨，采纳Corne和Bo1.ton的阿辛蓝染色法测定证明，丹参可促进胃壁

6、结合黏液分泌，先后用消炎痛抑制和外源性PGE1.反抑制试验，提示其促进黏液分泌作用可能部分是由刺激内源性的前列腺素(PGS)合成和释放所介导。预先灌服香砂六君子汤煎剂后经大鼠胃内注入0.2mo1.1.NaOII的试验显示该方能明显抗NaOH造成的胃黏膜出血及条索状的损伤。洪缨5用阿辛蓝染色法测胃壁结合黏液量显示该方有增加胃壁结合黏液量的趋势。刘宝臣6用人参、黄黄、甘草、白芍等健脾益气中药制成胃黏膜爱护方，发觉可以预防乙醇、强酸、强碱造成的黏膜出血性损伤。健胃补脾汤是临床治疗胃脱痛、噌杂的阅历方，选用党参、白术、茯苓、甘草、半夏、陈皮、黄连、吴茱萸、海螺照、煨瓦楞子、蒲公英、白及十二味中药。本试

7、验旨在通过动物试验视察健胃补脾汤对乙醉性胃黏膜损伤的预防和爱护作用，并从血清NO、血浆前列腺素E2等多方面探究可能的作用机制。1材料与方法1.1试验动物健康昆明小白鼠120只，体重2530g,雌雄各半，浙江中医药高校试验动物中心供应。标准饲料饲养于浙江中医药高校试验动物中心。1.2 试验药品95%乙醇:500m瓶，浙江省中医院，批号：090825;氯化钠注射液：250m1.瓶，浙江平湖莎普爱思制药有限公司，批号：090913:总一氧化氮检测试剂盒：江苏海门碧云天生物技术探讨所，批号：20090418;小鼠前列腺素E2试剂盒：上海西唐生物科技有限公司，批号：20090604o1.3 试验器材小鼠

8、潴胃器，烧杯，量桶，电子分析天平（上海天平仪器厂），台式高速离心机（上海医用离心机厂），O1.ympus光学显微镜（日本O1.ympus公司）。1.4 药物制备1.4.125%乙醇制备取适量95%乙醉，用生理盐水配制成25%乙醇溶液。1.4.2健胃补牌.汤制备党参10.0g,白术10.0g,茯苓10.0g,甘草6.0g,陈皮10.0g,制半夏10.0g,黄连6.0g,吴茱萸3.0g,海螺蚯15.0g,煨瓦楞子15.0g,蒲公英15.0g,白及10.0g,上述十二味药药材均由浙江中医药高校附属第一医院中药房供应，并在中药房煎取水煎剂。1.5试验方法1.5.1动物选择与分组取健康昆明小白鼠120只

9、，体重2530g,称重后编号，随机分成5组，每组雌雄各半，分别为正常比照组、模型比照组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组，每组动物均为24只。1.5.2 试验步骤中药低剂量组3m1.kg鼠垂，健胃补脾汤水煎剂灌胃；中药中剂量组6m1.kg鼠重，健胃补脾汤水煎剂灌胃；中药高剂量组1211dkg鼠重，健胃补脾汤水煎剂灌胃，之后再以8m1.kg鼠重，25%乙醇溶液灌胃。模型比照组以8m1.kg鼠重，25舟乙醉溶液灌胃；正常比照组以8m1.kg鼠重，生理盐水灌胃。以上各组按上述给药方法每日1次，连续给药7天。于第6天给药结束后，马上禁食不禁水24h。末次给药后2h,以眼球摘除法取血及处死；剖腹

10、取胃后，沿胃大弯剪开胃，4C的生理盐水中轻轻漂洗后，于胃窦部剪取胃组织。1.5.3 视察指标1.5.3.I病理学检查在胃窦的相同部位切取5mm5mm的胃黏膜组织，用10%甲醛固定，常规脱水,石蜡包埋，4m厚度连续切片，HE染色，在显微镜下视察各组胃黏膜的病理学变更。1.5,3.2各组血清中一氧化氮(NO)的含量取小鼠血Im1.注入1.5m1.的离心管中，静置10min,4C下2500rm离心，20min后取上清液(501),-20C保存至测定。以Griess法检测血清NO含量，测定时严格依据说明书操作进行。1.5.3.3各组血清中前列腺素E2(PGE2)的含量取小鼠血1m1.,注入1.5m1.

11、的离心管中，静置10min,4C下2500rm,心，20min后取上清液，-20C保存至测定。以E1.ISA法检测血清中PGE2含量，测定时严格依据说明书操作进行。1.6统计学方法计量资料用均数标准差(XS)表示。用SPSS13.0软件统计包对各组数据进行统计分析。多组间均数比较用方差分析，均数间两两比较用q检验。均以PO.05为差异有统计学意义。2结果2.1各组小鼠胃黏膜变更2.1.1肉眼大体视察正常比照组小鼠胃黏膜呈粉红色，表面光滑，黏膜皱裳光整，表面无充血水肿，未见渍疡、糜烂、出血点。模型比照组小鼠胃黏膜皱裳光整，可见点状出血点。中药治疗组小鼠胃黏膜皱裳光整，其中低剂量组偶见点状出血点。

12、2.1.2病理学检查病理学检查显示：在光学显微镜下，正常比照组胃黏膜结构正常，层次清晰，黏膜层无炎性细胞浸润;模型比照组上皮局部腺体结构紊乱，黏膜表面及腺腔内少量炎性渗出物，高倍镜下中性粒细胞增多明显。各中药治疗组腺体排列较整齐，少量炎性细胞浸涧，未见坏死组织及出血。2.2 各组血清中NO的含量见表1。表1各组血清中NO的含量表1结果显示血清NO含量，模型比照组与各中药治疗组血清NO含量均显著低于正常比照组，且差异有统计学意义(P001)；中药低剂量组血清NO含量高于模型比照组，但差异无统计学意义(P0.05);中药中剂量组血清NO含量高于模型比照组，且具有统计学意义(P0.05),中药高剂量

13、组血清NO含量显著高于模型比照组，且差异有统计学意义(P0.01).各中药治疗组之间，中药低剂量组与中药中剂量组、中药高剂量组比较差异有统计学意义(P005),中药中剂量组与中药高剂量组之间差异无统计学意义(PO.05)O2.3 各组血清中PGE2的含量见表2。表2各组血清中PGE2的含量表2结果显示血清PGE2含量，模型比照组与各中药治疗组血清PGE2含量均显著低于正常比照组，且差异行统计学意义(P001);中药低剂量组血清PGE2含量高于模型比照组，但差异无有统计学意义(P005);中药中剂量组与高剂量组血清PGE2含量高于模型比照组，且差异有统计学意义(P005).各中药治疗组之间，中药

14、低剂量组与中药中剂量组，以及中药中剂量组与中药高剂量组之间差异无统计学意义(PO.05),中药低剂量组与中药高剂量组之间差异有统计学意义(P005).3探讨胃是乙醇较早接触的重要器官，乙醇经胃汲取后，由于胃内存在有乙醇脱氢酶和黄嗦吟氧化酶，前者催化乙醇生成乙醛，后者可催化乙醛代谢产生自由基，自由基在酒精性胃黏膜损伤过程中具有重要作用7,8o乙醇作为一种损伤因子，是常见的急性胃黏膜损伤模型之一9试验探讨表明，乙醉性胃黏膜损伤时，胃黏膜充血、水肿，甚者糜烂和出血，病理变更是胃黏膜损伤，如腺体结构紊乱、炎性渗出等。本试验结果显示：25舟的乙醉灌胃所致的胃黏膜损伤，预先赐予小鼠胃内灌注健胃补脾汤，可减

15、轻胃黏膜的损伤程度。肉眼大体视察模型比照组小鼠胃黏膜皱裳光整，可见点状出血点。而中药治疗组小鼠胃黏膜皱裳光整，其中低剂量组偶见点状出血点。国内外探讨表明，较自由基的大量生成是乙醇性急性胃黏膜损伤的重要发朝气制之一。内源性NO能够清除氧自由基，改善胃黏膜微循环，减轻急性W黏膜损伤程度,对胃黏膜有爱护作用10。NO作为内源性血管舒张因子，可有效舒张血管，增加胃着膜血流量，降低血管的通透性以维持血管壁的完整性，防止胃黏膜损伤，并可促进黏液合成，增加黏液层厚度，加强黏液屏障作用，抑制胃酸分泌。依据本试验探讨血清NO的含量结果显示，健胃补脾汤对乙醉性胃黏膜损伤的爱护作用，可能是通过提高血清NO含量实现的，并存在量效关系，中、高剂量的爱护作用要优于低剂量。试验探讨11,12认为前列腺素(PGE2)合成削减可能在乙醇引起胃黏膜损伤中起着重要作用。据本试验结果显示，测定血清中PGE2的含量表明，健胃补脾汤有提高血清PGE2的作用，从而对乙醇性胃黏膜损伤起爱护作用，并存在量效关系，中、高剂量的爱护作用要优于低剂量。4结论本试验证明，健胃补脾汤对乙醉性胃黏膜损伤具有较好的预防和爱护作用，其中中剂量与高剂量的效果比低剂量更好。健胃补脾汤可肯定程度增加血清NO含量，且存在量效关系。这是其预防和爱护乙醉性胃林膜损伤的作用机制之一。健胃补脾汤可肯定程度