检验科性能验证程序文件.docx

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1、检验科性能验证程序文件一寸光阴不可轻性能验证1 .目的验证检测试剂在仪器上的性能指标。2 .适用范围适用于检验科检验项目试剂的性能指标验证。3 .职责3.1 科主任：负责审批性能验证计划。3.2 技术负责人：3.2.1 负责制定性能验证方案和计划。3.2.2 负责组织性能验证的实施。3.2.3 负责定期对科室性能验证数据的统计、分析和总结。3.2.4 负责组织对上述活动的可行性和有效性评审。3.3 各专业组技术管理员：3.3.1 负责组织本组人员完成本组性能验证的验证工作。3.3.2 负责对本组性能验证数据的统计、分析和总结工作。3.4 检验人员：3.4.1 负责协助科室技术负责人和本组技术管

2、理员完成本组的性能验证工作。3.4.2 负责完成本组机能验证工作中应承担的检验工作。3.4.3 负责认真填写本组机能验证的检验记录。4 .内容4.1 生化：生化室项目需要验证的参数包括批内精密度、批间精密度、正确度、线性范围、参考区间、可报告区间等。适用时,还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时,可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。4.1.1 精密度：4.1.1.1 标本准备及要求：可采用新鲜或冻存的样本。当样本中待测物不稳定或样本不易得到时,也可考虑使用基质与实际待检样本相似的样本,如质控品。应至少评估2个浓度水平样本的不精密度。当2个浓度水平样本的

3、不精密度有显著差异时,建议增加为3个浓度水平。所选样本的被测物水平应在测量区间内,适宜时,至少有1个样本的被测物水平在医学决定水平左右。注1:通常较高值样本的不精密度较小,较低值样本的不精密度偏大。对低值有临床意义的检测项目,宜评估有判断价值的低水平样本的不精密度。注2:如检测结果没有明确的医学决定水平,可在参考区间上限左右选1个浓度,再根据检验项目的特点在测量区间内选择另一个浓度。注3：如与厂商或文献报导的不精密度比较,所选样本水平宜与被比较的样本水平接近。4.1.1.2 方案：方案1:对验证材料每天分析1批次,2个浓度,每个浓度重复测定4次,连续5天。记录结果并计算均值、标准差和批内、批间

4、变异系数CV(%)。方案2:批内精密度:浓度分别处于一般和病理水平的夹杂新鲜临床标本,按照临床标本相同的检测方法,同批次内检测夹杂的新鲜临床标本20次。记录结果并计算均值(X)、尺度差(SD)和批内变异系数CV(%)o一寸光阴不可轻批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本20次，同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。4.1.1.3结果判断4.1.2 正确度4.121 标本准备及要求按照如下优

5、先顺序选用具有互换性的标准物质或基质与待测样本相类似的标准物质：1）有证标准物质（CRM）,包括国家标准物质（如GBW）、国际标准物质（如WH0、IFCC）、CNAS认可的标准物质生产者（RMP）提供的有证标准物质、与我国签署互认协议的其他国家计量机构提供的有证标准物质（如NIST、JSCO等；2）标准物质（RM）,如厂商提供的工作标准品；3）尺度物质（RM）,如厂商提供的工作尺度品；4）正确度控成品；5）正确度验证室间质评样本，如CNAS认可的PTP提供的正确度验证样本。宜根据测量区间选用至少2个浓度水平的尺度物质样本。6）卫生部或省临检中心室间质评质控血清含盖的项目，则以卫生部或省临床检验

6、中心室间质评结果为准。卫生部或省临检中心室间质评未涉及的项目，经由过程仪器之间的比对来验证。4.122 方案方案1：根据测量区间选用2个浓度水平的室间质评血清，每个浓度水平每天重复测定2次，连续测定5天，记录检测结果，计算全部检测结果的均值和偏倚。方案2:使用5个水平的室间质评血清，每个水平重复测定3次。记录结果，计算每份质控血清均值与靶值的偏倚。4.123 线性范围4.1.3.1目的：在确定某项目检测上限的同时检测其检测上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。4.1.3.3验证频率：仅在更换试剂盒厂家时进行验证。一旦验证通过，无特殊情况，不重复验证。一寸光阴不可轻4.134

7、方案方案1：不同浓度标本制备：取高值和低值标本各一份，按如下配比：标本1：低浓度样本；标本2：三份低浓度标本与一份高浓样标本混匀；标本3：二份低浓度标本与二份高浓样标本混匀；标本4：一份低浓度标本与三份高浓样标本混匀；标本5：高浓度样本。检测时，按标本123,4,5,5,4,3,2,1,1,2,3,4,5排列，每个标本测量3次，记录浓度以理论浓度为纵坐标(Y),实测浓度为横坐标(X)。由统计学计算出己和回归方程Y=aX+b0方案2：取高值标本和低值标本各一份，将两者按一定的比例稀释成系列不同浓度的标本(如4:0、3:1、2:2、1:3、0:4等)，浓度范围遍布整个预期可报告区间，分别上机按低到

8、高各重复测定3次，计算线性回归方程Y=aX+b及相关系数R2。4.135验证结果判断a在0.951.05范围内，b接近,R0.9759R20.95,则判断为线性范围验证通过。4.1.4参考区间4.1.4.1 标本挑选挑选年龄、性别等均匀分布，吻合建立参考区间的健康体检者血清标本20份，对不同项目的参考区间举行验证。如碱性磷酸酶(A1.P)等在不同年龄人群的不同参考区间应分别举行验证，如某些年龄人群标本不易获得时，可暂不做验证，但需与临床沟通，关于性激素等检测项目因心理周期变革等因素导致无法获取有效人群标本，暂不做验证，但亦需与临床沟通。4.1.4.2 结果判断：规定小于或等于2份标本结果超出参

9、考区间,即为验证通过。或R=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数90%即合格。4.1.5最大稀释倍数和可报告范围验证4.151仅对于那些临床可报告区间大于分析测量范围的检测项目才需要进行验证。通常是在线性范围高值的基础上外延至最大稀释度倍数对应的值。4.1.6携带污染验证4.162评价方案：选取一份检测线性范围内的高浓度标本（三）,以及一份低值标本或生化纯水(1.),按照下列次序进行检测：H、H、H、1.、1.、1.,测定值分别为：H1.、H2、H3、1.I、1.2、1.3,计算携带污染率=(1.1.-1.3)/(H3-1.3)*100%o4.163结果判断：携带污染率W2%。4.2免疫-定

10、性(E1.ISA法)操作者熟习检验程序和评判操作程序，对操作程序校准为最佳状态，严格按操作程序举行验证。从以下几方面举行验证：灵敏度、特异性、吻合率、检出限、CUtOff值验证、重复性和比对试验。421符合率、敏感度和特异性一寸光阴不成轻4.2.1.1根据C1.SI发布EP12-A2文件要求(应参考定量分析将偏倚和不精密度应用于定性试验的评价，除阴性和强阳性标本外，选取在临界值附近的浓度用于定性试验不精密度的研究。)来验证本实验室定性实验的符合率、敏感度和特异性，计算了近一年参加卫生部临检中心室间质评的对比结果，将两方结果输入表格中通过公式计算各项性能指标。实验方法(新方法)金尺度阳性(n)阴

11、性(n)合计阳性a(真阳性)b(假阳性)a+b阴性c(假阴性)d(真阴性)c+d合计a+cb+da+b+c+d总吻合率=(a+d)(a+b+c+d)x100%,灵敏度=(a+d)(a+b+c+d),特异性=d(b+d)421.2结果判断按照卫生部临检中心对室间质评结果的要求认为80%及以上即为满意，故选择80%作为评价结果是否可接受的标准。灵敏度95%o特异性295%。4.2.2人员比对4.2.2.1方法拔取至少20份标本(包括阳性、阳性和弱阳性)，先由实验室经验丰富的操作人员举行实验，以其实验结果作为参照，一切从事该项目检测的人员均对同标本举行操作，将各自结果与参照结果举行比对。参考人员结果

12、阳性（n）阴性（n）合计阳性a（真阳性）b（假阳性）a+b检测人员结果阳性c（假阳性）d（真阳性）c+d合计a+cb+da+b+c+d总符合率=（a+d）（a+b+c+d）x100%4.222结果判断以本实验室参加人员检测结果与参考人员检测结果是否达到80%以上（80%以上即可，如能做到更高，可以以更高的标准来判断）来作为判断标准。4.2.3定性实验的检出限将定值样品进行倍比稀释(如稀释到原浓度的2、4、8、16倍)后进行检测。首次出现阴性的前一个稀释倍数为该实验的检出限。4.2.4CUt-Off值验证方法1：在临界值基础上，准备出-20%浓度样本和+20%浓度样本(即定值样品本身)，对以上低

13、、高浓度样本分别测定20次，记录阴性及阳性结果数，即为CUt-Off重复性验证。应至少有19次以上(N95%)阳性反应或者有19次以上(95%)阴性反应为通过。方法2：连续统计上百份已检测样本结果，计算临界值结果所占的比例,小于5%为可接受限。425精密度425.1批内精密度验证4.2.5.1.1验证方法选弱阳性室内质控品在同一批试验内，按规定的操作方法，一天内平行做20个测试相同的样本，计算其x、S与CV。4.251.2结果判断一寸光阴不可轻定性实验(E1.ISA)的批内变异CV%应010%(请确认)。或用卫生部临检中心的允许总误差、说明书、C1.1.v88等做判定尺度。4.252批间精密度

14、验证4.2.5.2.1方法选择弱阳性室内质控品，每天按照常规标本的方法一样测定，连续测定20天，计算其x、S与CV。42522结果判断定性实验（E1.ISA）的批间变异CV%应515%（请确认）。或用卫生部临检中心的允许总误差、说明书、C1.1.A用8等做判定尺度。4.2.6比对试验分别收集化学发光法检测出的HBeAg20例阳性及20例阴性样本，用酶联免疫方法进行比对检测，根据阴阳性结果评价检测结果的符合率。结果判断：用阴阳性判断两种方法检测结果的吻合率。4.3 免疫.定量根据试剂盒说明书或行业内（如C1.1.A，88）要求制定拟验证的性能参数。免疫的定量项目性能验证参考生化的性能验证。4.4

15、 临检（血常规）相关性能参数包括：精密度（批内、批间精密度）、正确度、携带污染率、线性范围、可报告区间、参考区间的验证、不同方法和仪器间的比对、仪器分类结果与手工分类结果的比对、实验室内结果的可比性等，必要时，还要考虑干扰。4.4.1 精密度4.4.1.1.样本检测（可参考）参照美国临床实验室标准化委员会（NCC1.S）EP15A“用户对精密度和准确度性能的核实：批准指南”中关于精密度的内容要求，用两个浓度水平的质控品，每天上机测量4次（连续测定，中间不间断），连续测量5天。4.4.1.2数据分析方法（可参考）按照EP15-A文件之规定，通过EXCe1.软件，计算出批内标准差Switin和批间标准差Stota1.具体的计算公式为：其中：D：表示总共检测天数(D=5);n：单个样本每天重复检测的次数(n=4)；xdi：每个样本每天四次单独检测的结果；xd：每个样本每天四次检测结果的算数均数；xt：单个样本每天检测结果的算数均数的算数均数。441.3结果判断(可参考)4.4.1.3.1于批内精密度的判断，具体的计算和判断过程:1)按照下述公式计算出批内精密度的自由度VoD：表示总共检测天数(D=5);n