GB_T 43722.1-2024 皮革 抗菌性能的测定 第1部分：膜接触法.docx

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1、ICS59.140.30CeSY46GB中华人民共和国国家标准/T43722.12024皮革抗菌性能的测定第1部分：膜接触法1.eatherDeterminationofantimicrobialactivity-partl:Filmcontactmethod2024-03-15发布2024-1（三）I实施国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会本文件按照GBT112020标掂化工作导则第IfS分I标准化文件的结构和起草规则的规定起草，本文件是GB/T43722皮革抗衡性能的测定的第1郃分.GB/T43722已经发布了以下部分：一一第1能分：膜接触法.请注意本文件的某些内容可能涉及专和。本文件

2、的发布机构不承IU识别专利的责任，本文件由中国轻【：业联合会提出.本文件由全国皮革1：业标准化技术委员会（SAC/TC252）归口.本文件起草单位：通标标准技术服务（Jb海）有限公司、浙江通天星集团股份有限公司、大康控股第团有限公司、深圳市北潢（检测技术有限公司、上海应用技术大学、西南交通大学、广东省科学院微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）、天创时尚股份有限公司广东新庆成实业投资有限公司、江苏型萃先进纤推材料研究所有限公司、期盛化学（中I中有限公司、博富科技股份有限公司、上海市徐汇区疾病预防控制中心、上海润河纳米材料科技有限公司、中国皮革制鞋研究院牙隈公司、中轻险险认证有限公司、中关村汇

3、智抗靖新材料产业技术创新联盟,本文件主要起草人r蒋红、陈健、胡龄.播晓玲、彭如群、徐祥进、刘志勇、嚓武名、傅洋安、便兼明、梁嘉俊、周家良、张瑜、廖宇涛、陶志清、桑军、任可帅、张迎增、朱方、周业华、钱子场谢小保、0取皮革产品作为皮胶原蛋白胡的加工产品，加工过程中使用的原辅料中含外大W的油脂、糠类等成分，是细前、毒81生长的良好营养源,再加上皮革结构的多孔性和极性结构使儿容易吸湿，从而导致其在保存和使用过程容易受到激生物的侵入,不仅在皮革表面形成白色、蓝色，黄色或里色的雨班或色斑，而且还能向革内发展,使皮革的耐磨、限度和弹性等性使静低，严史影响或外观及使用性能.此外，防者人们对于侬防疾病的就双不断

4、坨强,各类抗菌材料和产乱成为人们关注的对象.明示或宣传的.抗菌性能的皮革制品也逐渐成为决定市场比争力的巫要因索之.皮革产品根据其来源、加工过程等分为不同的类型。如根据表面吸水性的差异，可分为表面不吸水皮革和表面吸水性较削的皮革：根据皮革抗菌剂溶出性的不同,可分为非溶出55抗菌皮革和溶出型抗菌皮革等，皮革抗曲性能的测定可以根据皮革种突采用适合的检测方法.GB/T13722旨在为皮革抗菌性能的测定提供依据，拟由四个部分构成,第1部分：膜接触法H的在于确立适用于表面不吸水皮革抗菌性能测定的定成试验方法，一一第2部分：琼脂平扩散法.目的在J确立皮革抗菌性能测定的定性试蛤和评价方法.第3部分I询液吸收法

5、。目的在于确立适用于表面吸水性很强的皮革抗菌性能测定的定匏试验方法.一一第，1部分：振荡法。H的在于痂立其他膜接触法和俏液吸收法不适用的皮革（尤其适用干使刖了非溶出型抗施剂的皮革）抗茴性能测定的定业试腕方法，皮革抗菌性能的测定第1部分：膜接触法示一本文件读及的微生可作人员应果取一切必要的ItmM,免对人员和环域的危IClt应由住过生学靖调且具育实IMS的业人员在具备处覆微生技术条件的实中进行.1MH本文件描述了眼接触法测定皮革抗两性能的定Jft试验方法.本文件适用于不吸水皮革抗阑性能的测定.2提范住W用文件下列文件中的内容通过文中的现苞性l用而构成木文件必不可少的条款,其中，注H期的引用文件.

6、仅该Il期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件.共最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件.QB/T2707皮革物理和机械试验试样的准备和调节3术语和定义下列术语和定义适用于本文件.11抗性antimkrohialactivity采用化学或物理方法杀灭或妨均细偈和f（i长繁殖,以减少其数址以及活性的能力。求源：BST650-2019,3.1,有倏改J3.2对照样controlsample未经抗茴处理、用于验证试股微生物生长条件的样品。4*9通过接种定员微生物至不吸水的皮革试样表曲.用贴股的方法使微生物均匀接皱试样表面.经一定时间培养后,测定试样衣面的活胸数，计用抗1率，以此衣示试样的抗映

7、性能.5仪务5.1 恒温培养箱，控温林度为lt.5.2 冷藏箱,淑度能够保持在2C10C.5.3 ：缎生物安全柜。5.4 生物光学电做镜.5.5 压力蒸汽灭菌器，温度能保持在(1212)C,压力能保持在(1035)kPa,5.6培养W,食径为90mm.5.7 紫阳T.5.8 接种环,4an-5.9 天平，制度为001g.5.10 PH计.精度为0.2.5 .11模刀，符令PB/T2707的规定，内壁为(5O2)mm(5Q2)rrm的矩形，66.1 除特殊说明外，所用试剂均为分析纯，试骆用水应为然愉水或去离子水6.2 氮氯化钠(NaOH)溶液，0.1mW1.,6.3 盐酸(HCl)溶液，0.1m

8、d1.r6.-1瓶化钠(NaCT)溶液，0.85%(桢依分数)。6. 5无水微酸以XlWNazHPO4)。6.6 磷酸二氮钾(KWPO,).6.7 乙醉溶液,7慎(体积分数九1.1 8磷酸媛冲液(PBS),将2.83gNa3IIPO4(6.5)和I.36gKH2PO4(6.6)加入至100om1.蒸阳水中.待完全溶解后,MjNaOH溶液(6.2)或HCI溶液(6.3)悯节PH为77.4.分奘后置于力蒸汽灭阳涔中，(12】2)C条件下灭崩15min。1.9 洗脱液,采用D/E中和肉涉(Dey-EngleyNeutralizingBMh)作为洗脱液。将5.Og股液白膝、2.5g薛母粉、10.0g他

9、筠糖、1.0g硫代乙解酸钠、6.0g能代破酸咕、2.5g亚能酸气钠、0.02g澳甲酚紫、7.0g卵磷脂、5.Og吐温80,加入至100Om1.蒸储水中.巴于椎形瓶中混合并在沸水浴中充分溶解。然后用NaoH溶液(6.2)或HCl溶液(6.3)调节PH为7.07.2,分装后置于压力蒸汽灭曲器中，(12l2)4C条件下灭陷15min,1.10 覆盖廉，采用聚乙优酉股，尺寸为(402)mmx(4O2)mm,也可与试样尺寸相适应，厚度为0.05三n-0.IOmno用乙肿溶液67)浸泡10min.再用蒸询水冲洗，自然晾干。也可使FH均质袋切下的膜.1.11 对照样，聚乙烯片材质，厚度10mm,尺寸为(5O

10、2)mmx(5Oi2mm.与试样尺寸一致.也可使用均桢袋切下的腹，7 4HHI7.1 养肉满培养苔(、B)将5.Og牛肉啬、10.Og蛋白麻和5.Og氯化钠与ICloOm1.蒸场水混合，加热溶解，然后用NaOH溶液(6.2)或HCl溶液(6.3)调节PH为7.。7.2,分装后置于压力蒸汽灭倒器中，(1212)。条件下灭菌15min.7.2 普养4W、A)将5.Og牛肉力、10.Clg货白豚、5.0g氯化钠和15.Og琼脂与I(X)Om1.蒸慵水混合，加热溶斛，然后用NaoH溶液(6.2)或HCI溶液(6.3)调节PH为7.0-7.2,分装后置于压力蒸汽灭菌器中，(1212)条件下灭菌15min

11、.将5.Og马玲养浸粉、20.Og衙明、20.Og琼腑和0.Ig慰荐家与100Qm1.然愉水混合，加热煮沸至完全溶解，然后用NaoH溶液(6.2)或HQ溶液(6.3)调节PH为5.86.2,分装后置于压力蒸汽灭菌器中，(1212)匕条件下灭菌15min.7.4 平板计IBSPeA)将2.5g酵母粉、5.Og胰蛋白陈、1.Og葡荀糖和15.Og琼脂与KXX)m1.-慵水混合,加热溶解，然后用NaoH溶液(6.2)或HcI溶液(6.3)解节PH为107.2,分奘后置于压力蒸汽灭菌器中.(12l2)C条件下灭菌15min.8 Mumam试验前种通常至少采用3种.如下所示.革兰氏阳性M：金黄色简与球倒

12、(细笛，ATCC6538或CGMCC1.2465),革兰氏阴性菌：大肠杆菌(细衡，ATCC8739CGMCC1.2463).白色金珠储(真做，ATCC10231或CGMCC2.2086),也可根据客户要求选FH其他曲种，应至少包括细赭和口曲，其中细扁种类至少含有I种革丝氏阳性和1种革兰氏阴性菌种，并在报告中注明试脸曲种及编号.所有曲种均应由国家相应曲神保藏管理中心提供.选用其他菜种时，培养基成分、培养温度和培养方法可根据需要调整。&2对于金黄色徇Q理曲和大肠杆笛，将常种接种于NA(72)斜面上，在(37D*C下培养18h24h;对于白色念珠身，将曲种接种于PDA(73)斜面上，在(281)C下

13、培养24h-48h,然后置于5CIClC下保存(不应超过I个月)，作为斜面保存苗.9 ma三MM*9.1 瞭液的备用Naa溶液(6.力稀择NB培养基,用于金黄色葡而球菌培养的NB质限分数为1%用于大肠杆苗培养的NB质量分数为0.2%,白色念珠由采用磷酸缓冲液(PBS)配制。用NaOH溶液(6.2)或HCl溶液(6.3)调节PH为7.07.2,分装后置于压力蒸汽灭常港中.(1212)1C条件下灭曲15min。为便于菌种分散可加入少Iit表面活性剂(如吐温-80等).9.2 mK1t时于金黄色面箱球笛和大肠杆南，将斜面保存倒转接至NA(7.2)平板上，在371)C下培养18h-24h,再连续转接I

14、次后(在5代以内)的新鲜曲种培养物(24h内培养物)用于阳悬液的制得：对于白色念珠菌,将料面保存衡转接到马性嘱培养基(PDA)平板上，在(281)P下培笄24h48h,再连续转接1次后(在5代以内)的新鲜曲种培养物(18h内培养物)用于倒悬液的制备，9.3 MftMM用接种环8)从9.2的新肝菌种培养物上取I环2环新鲜苗种，加入到20ml.接种液(9.1)中，用显微镜观察法或其他合适的方法估计活函数目，10倍悌度稀糅并选择的液浓度为2.5X105CFVXm1.v10.OX10sCFln1.的稀择液作为试验曲液，该试验菌液冰冷3C4C保存,在4h内使用.10试祥的准备10.1 试样和对Ml祥的祥

15、试样：用模刀从粒面切取6块尺寸为(5O2)mm(5Oi2mm的试样，试样厚度不应大于5mm,3片用于“0”接触测试，3片用于现定时间的接触测试.若试样尺寸无法满足切取条件,可切取6块尺寸不小于(20l)mmx(20l)mm的试样，同时覆i膜凝乙循薄眼也相应减小。对照样(6.11):6片，3片用于“0”接触测试,3片用于规定时间的接触测试。W.2试样和财Im的灭通常采用紫外灯处理灭雨.将试告和对照样的正反面在紫外灯下分别照射灭菌.也可选用其他适宜的灭曲方法试样的灭雨处理应以不影响试样的抗菌性能为喉则.如采用其他灭菌方法陶在试收报告中注明,1111.1将试样和对照样分别放入火前培养皿中，保持待测面向上,用移液管分别移取54ml.偏悬液(9.3),慢滴加到每个试样和对照样的待测面上，然后将聚乙胡薄膜(6.10)施于曲液上，调节使曲液分改到整个架乙烯薄胶,注意避免的液从薄膜边续溢出，荒上培养皿的上诙，每处试样做3个平行试恐若试样尺寸较小，可移取0.1m1.-0.4ml.前悬液,使贴膜后试样表面的1液中含苗数Ift达到1.0