《普通植物病理学》实验指导.docx

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1、普通植物病理学实验指导前后普通植物病理学实验指导主要是配合普通植物病理学的教学内容,帮助学生理解和掌握植物病理学的基础理论,学习基本知识和基本技能的实验指导课。内容包括两大部分,一是植物病害的症状识别和病原生物的形态特征的观察,二是有关病害的侵染、流行和有关实验研究的基本技术。通过实验,培养和提高学生的观察、思考、分析的能力,锻炼学生独立操作的能力。实验内容的安排旨在引导学生逐步进入植物病理学的领域,并为以后深入学习病原生物学、农业植物病理学、植物病害防治学和进一步开展试验研究打下坚实的基础。目录注意事项1 .每次实验前,学生要仔细预习实验指导,明确实验的目的与要求,了解实验内容和应注意的事项

2、。2 .认真昕取老师指导,按要求逐项细心操作,爱护仪器设备,节约材料,损坏物品要及时报告。3 .遵守实验室纪律。实验时,不准在实验室内谈笑喧哗、吸烟与饮食,不要在室内来回走动,共同保持室内的整洁与安静。严禁以酒精灯互相点火,以确保安全。4 .认真记录实验的结果,绘图要精确,比例要适当,按时上交实验报告。5 .实验结束时,仪器用具要擦干净并放回原处,清除垃圾,实验室要打扫干净。6 .需要进一步培养观察的实验材料,应写好标签,注明实验内容、日期和试验人员姓名,以防混沼或丢失。7 .学生应准备绘图纸、报告纸、HB和2H的绘图铅笔、直尺、小刀和橡皮等绘图用具等。实验一：植物病害症状观察一、目的要求认识

3、各类病害对植物造成的为害，了解植物病害的种类及其多样性，初步掌握主要病害的症状表现及其特点，学会植物病害症状的描述,为今后病害的诊断奠定基础。二、材料、试剂与仪器按照植物病害的病状类型（变色、坏死、斑点、腐烂、畸形）和病征类型（粉状物、霉状物、点状物、菌核、溢脓等）的盒装标本、瓶装浸渍标本及新鲜标本。各类症状的挂图、模型、多媒体课件等。拨针、刀片、木板、酒精灯、火柴、裁玻片、盖玻片、纱布、乳盼油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、吸水纸等。三、内容与方法（一）植物病害症状观察植物病害的症状是植物患病后由于异常生理活动而发生在细胞和组织上的病理变化,最后表现为肉眼可见的形态变化。植物病害的症状可区别为两类

4、不同性质的特征:病状和病征。病状是一定的寄主植物和病原在一定外界条件的影响下相互作用结果的外部表现,是以各自的生理机能或特性为基础的。而每种生物的生理机能,都是在质上有特异性,并且是相对稳定的。病变,作为这种相互作用过程的结果,一般说其发展是定向的。病状作为病变过程的表现,其特征也是较稳定的和具有特异性的。这就是利用病状诊断植物病害的基础。病征是由病原微生物的群体或器官着生在寄主表面所构成的。它更直接地暴露了病原物在质上的特点。如真菌子实体在寄主表面形成的霉层、黑点等。由植物病毒、植原体、许多病原细菌、非侵染性植物病害等无病征的表现。病征的出现与否和出现的明显程度,虽受环境条件的影响很大,但一

5、经表现出来却是相当稳定的特征,所以根据病征能够正确地判定病害。病状和病征，尤其是前者,作为诊断病害的依据也有其局限性。首先是许多植物病害常产生相似的病状,因此要从各方面的特点去综合判断；其次,植物常因作物品种的变化或受害器官的不同,而使病状有一定幅度的变化；第三,病害的发生发展是一个过程,有初期和后期，病状也随之而发展变化；第四,环境条件对病状和病征有一定的影响,尤其是湿度对病征的产生有显著地作用,加之发病后期病部往往会长出一些腐生菌的繁殖器官。因此,症状的稳定性和特异性只是相对的,要认识症状的特异性和变化的规律,在观察植物病害时,须认真地从症状的发展变化中去研究和掌握症状的特殊性。观察和采集

6、植物病害标本,仔细地区别病征的那种微小的、似同而异的特征,这样才能正确地诊断病害。1病状的观察（I）斑点观察玉米大斑病、棉花角斑病、大麦条纹病、大葱或大蒜紫斑病、番茄早疫病、十字花科霜霉病等标本。注意不同类型病害所表现病斑的形状、大小、颜色等的异同以及病斑上有无轮纹、花纹伴生,同时注意观察各类病斑上有无病征以及病征的特点。斑点类发生在叶、茎、果等部位,受病组织局部坏死,一般有明显的边缘。斑点中还可以伴生轮纹、花纹等特点。根据病斑的颜色、形状等特点而分为褐斑、黑斑、紫斑、角斑、条斑、大斑、小斑、胡麻斑、轮纹斑、网斑等多种类型。（2）腐烂观察甘薯黑斑病病薯、马铃薯环腐病病薯、柑橘溃疡病等病害标本,

7、认识该类病害对植物所造成的为害,同时掌握这类病害的病状特点。腐烂类病状发生在植物的各个部位,由于组织分解的程度不同,有软腐、干腐之分。根据腐烂的部位,有根腐、基腐、茎腐、果腐、花腐等名称,还伴随有各种颜色变化的特点,如褐腐、白腐、黑腐等。（3） .萎藏观察棉花、黄瓜等植物枯萎病、棉花和茄子黄萎病、玉米和茄科植物青枯病、马铃薯环腐病等标本。注意区别枯萎、黄萎、青枯等病状类型,必要时可以剖开病株茎秆观察维管束是否褐变。典型的萎籍病状是植物根、茎的维管束组织受到破坏而发生的叶片或枝条萎垂现象,皮层组织完好,萎猿病害常无外表的病征。植物受萎葛菌侵染后,不一定都能引起萎焉,发病初期有半边叶片、半个枝条萎

8、垂的现象,但更常见的是全株性萎蕉。提示：对于萎蔼类病害病状的观察应以新鲜标本为主,有条件时最好在田间进行,这类病害发生具有一定的地域性,观察时要注意其维管束组织的病变,干标本则失去了原有的特点。（4） .变色变色主要有两种类型。一种表现为黄化，是整个植株或叶片部分地或全部地均匀褪绿、变黄,或呈现其他的颜色。多数伴生有整株或部分的畸形。另一种为花叶，病株叶片色泽浓淡不均,深绿与浅绿部分相间夹杂,一般遍及全株,上部叶片较为显著,无病征表现。比较观察烟草花叶病、苹果花叶病、小麦黄矮病、瓜类、十字花科和茄科植物的病毒病病状，注意每一种病害的病状特点。（5） .畸形畸形类病状由不同组织、器官的病变，如叶

9、片的膨肿、皱缩、小叶、蕨叶；果实的缩果及其他畸形；整个植株的徒长、矮缩；局部器官如花器和种子的退化变形和促进性的变态等。瘤、瘦、疮、丛枝和发根也是常见的畸形病状。观察桃缩叶病、十字花科根肿病、马铃薯癌肿病、果树根癌病、油菜白锈病、枣疯病、泡桐丛枝病、玉米黑粉病、小麦粒线虫病等。2病征的观察（6） 粉状物借助扩大镜或实体解剖镜观察麦类锈病、十字花科白锈病、麦类白粉病、玉米黑粉病和麦类黑粉病等病害标本。注意粉状物的颜色、质地和着生状况等。（7） 霉状物借助扩大镜或实体解剖镜观察黄瓜霜霉病、瓜类软腐病、柑橘青霉病、番茄灰霉病和番茄叶霉病等病害标本或瓶装标本。注意区别霜霉、黑霉、绵霉、青霉和灰霉等不同

10、类型的霉状物。（8） 点状物取小麦白粉病、瓜类炭疽病、棉花茎枯病、芹菜斑枯病、苹果树腐烂病和麦类赤霉病等病害标本,借助扩大镜或实体解剖镜观察。注意点状物是埋生、半埋生还是表生,以及在寄主表面的排列状况、颜色等。（9） 菌核观察油菜菌核病等病害标本。注意菌核的大小、形状、颜色、质地等,并观察菌核萌发状况。（10） 脓溢脓为细菌性病害特有的病征。观察十字花科细菌性软腐病、棉花角斑病和黄瓜角斑病等病害标本。注意溢脓的颜色、出现位置等。用剪刀将植物病组织剪成4mm2的小块,放于载玻片上,加一滴水,盖上盖玻片,在显微镜下观察或直接用载玻片对光观察喷菌现象。四、实验作业与思考题将植物病害症状的观察结果填入

11、下表。寄主名称病害名称发病部位病状类型病症类型五、实验学时：2学时。实验二真菌一般形态观察一、目的要求通过观察，认识病原真菌的营养体及其变态,认识真菌的子实体、有性繁殖、无性繁殖产生的各种类型胞子。二、仪器与用品拨针、刀片、木板、酒精灯、火柴、裁玻片、盖玻片、纱布、乳酚油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、吸水纸等。三、实验材料1 .瓜果腐霉病菌(PytiUmaphanidermatum)2 .立枯丝核菌(RhiZOctOniasolani)3 .镰刀菌(fusarium)4 .小麦白粉病菌(BIUmeriagraminiS)5 .大白菜霜霉病菌(PeronoSPoraparasitica)6 .甘薯软

12、腐病菌(RhizopusStolonifer)7 .小核菌属(SClerOtiUm)8 .苹果或甘薯紫纹羽病菌9 .麦角病菌(Clavicepspurpurea)10 .疫霉菌(Phythophtoraspp.)11 .根霉菌(Rhizopusspp.)12 .毛霉菌(Mucorspp.)13 .犁头霉菌(Absidiaspp.)14 .玉米小斑病(BiPOlariSmaydis)15 .小麦白粉病(无性世代16 .马铃薯早疫病VAIternariasolani17 .棉花枯萎病菌(FUSariilmoysporium)18 .桃缩叶病菌(Aphrinadeformans)19 .小麦赤霉病菌

13、VGibereIIazeae20 .小麦腥黑穗病菌(Tilletiacaries四、内容与方法病原真菌的营养体即真菌营养生长阶段的结构统称为真菌的营养体。真菌典型的营养体是丝状体,少数为单细胞。单根丝状的营养体称为菌丝,许多菌丝在一起就称为菌丝体。用挑针挑取在培养皿内的瓜果腐霉病菌(PytiUmaphanidermatum)立枯丝核菌(RhiZoCtoniaSOlani)、镰刀菌(fusarium)的菌丝体,用蒸谭水或乳酚油作浮载剂,制临时玻片镜检,观察菌丝隔膜的有无、菌丝体直径变化是否明显以及颜色有无差别等。()真菌营养体的变态病原真菌营养体在一定条件下可发生变态而形成特殊的结构,这些变态是

14、真菌适应性的表现,其作用是抵抗不良的环境条件,有利于传播、固着吸收和繁殖。主要的变态有吸器、假根、菌核、子座以及根状菌索等。1吸器：吸器的形态有圆球状、棒状、裂片状、掌状、根状等。在示范镜下观察小麦白粉病菌(BIUmeriagraminiS)和大白菜霜霉病菌(PerOnOSPoraParaSitiCa)的吸器形态,也可用小镒子撕取病叶的表皮,制临时玻片放在显微镜下观察,注意吸器的形状和在细胞内的位置。2假根：是由菌丝分化的根状分枝。从培养皿内的培养基上挑取甘薯软腐病菌(RhizopusStolonifer)制片,镜检,观察在范囊梗基部的假根。3菌核：是菌丝纠结而成的坚固的颗粒状休眠体。观察小核

15、菌属(ScIerotium)的菌核切片及标本,以及水稻和油菜上菌核的标本。比较两种菌核的大小、形状和色泽有何不同？4根状菌索：许多菌丝体平行生长并纠结成绳索状,称为根状菌索。在示范镜下观察苹果或甘薯紫纹羽病菌的根状菌索。5子座：由菌丝体或由菌丝体和寄主组织共同组成的着生子实体的垫状物。在子座上形成无性或有性抱子。在显微镜下观察麦角病菌(Clavicepspurpurea)头状子座的切片，注意其内部结构与菌核的区别。(二)病原真菌的繁殖体一一子实体真菌产生抱子的机构称为子实体。病原真菌抱子的形态特征是鉴定和分类学上重要的依据。真菌的泡子可分为无性电子和有性胞子两类：1无性抱子指真菌无性繁殖过程中产生的各种抱子。这类抱子在形成过程中没有经过任何性结合的过程。(1)游动狗子囊和游动狗子：鞭毛菌亚门真菌的无性繁殖器官是抱子囊。大多数鞭毛菌抱子囊可释放出具鞭毛、在水中能游动的抱子,即游动抱子,故其狗子囊又称为游动抱子囊。镜检疫霉菌(PhythOPhtOraspp.)在水中的培养物,注意观察菌丝有无分隔、抱子囊的形态、游动狗子的形成以及释放过程,游动抱子休止后的形态,注意狗囊梗与菌丝有无区别。(2)抱子囊和抱囊抱子：接合菌亚门真菌的无性繁殖器官是抱囊抱子。镜检根霉菌(Rhizopusspp.)、毛霉菌(Mucorspp.)犁头霉菌(Absidiaspp.)