miRNA与电离辐射防护功能食品研究进展.docx

《miRNA与电离辐射防护功能食品研究进展.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《miRNA与电离辐射防护功能食品研究进展.docx（7页珍藏版）》请在优知文库上搜索。

1、电离辐射是能引起物质电离的辐射总称，可以通过直接或间接作用电离出物质中的原子和分子。随着核能的发展和核技术在能源和医疗等领域的广泛应用，电离辐射几乎无处不在，如果使用或控制不当，可对人类健康带来潜在的危害与风险。电离辐射对生物体的损害表现为生物体内重要器官损伤以及相关调控系统紊乱，这也会导致机体造血功能、生殖系统及免疫系统等不同程度的损伤，甚至发生癌变，其损伤程度取决于辐射种类、剂量、时间及机体的敏感性。如何有效防护这种慢性辐射，保障人员身体健康，具有重要的军事价值和社会意义。辐射防护剂是应用于辐照前后来保护机体免受辐射损伤的一类功能性制剂，其研究开发已成为当今医疗卫生、军事、能源等领域关注的

2、焦点之一。从天然产物或微生物代谢物中筛选制备具有电离辐射防护作用的功能食品基料，开发辐射防护功能食品，通过饮食调理提高机体辐射耐受性或降低辐射对机体的损害，是辐射防护的一条重要途径。目前己经报道的天然辐射防护剂，如黄酮类、多糖类、多酚类以及皂昔类等功能因子，能够通过清除自由基，促进DNA修复并调节凋亡信号通路，以减少辐射对人体造成的造血系统、消化系统以及神经系统的损伤，其作用时效长，成本低且无明显毒副作用。在研究中指出，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶中含量最高、活性最强的多酚类化合物，具有抗氧化、清除自由基和辐射防护等多种活性，以EGCG为主要组分的绿茶源食品一直是辐射防护食品开发

3、的热点。ImiRNAs、表观遗传和食品1.lmiRNAs与表观遗传miRNAs在基因转录和转录后加工、细胞分化和个体发育、遗传和表观遗传等几乎所有的重要生命活动中发挥重要作用，对miRNAs的鉴定及功能探索已成为当前生命科学研究的热点和前沿。表观遗传学是在不改变DNA序列的情况下，生物表现型发生改变，并保持相对稳定和遗传。表观遗传学研究表明，环境在生物表型改变中发挥重要作用，而电离辐射是一种重要的环境因子，也是表观遗传学研究的重要模型。近年来研究证实，表观遗传和miRNAs间存在着一定的联系，不仅miRNAs的表达受表观遗传学调控，而且miRNAs也可通过调节DNA甲基化或组蛋白修饰等途径影响

4、表观遗传。1.2 miRNAs与食品食品摄入是生物体与外界进行物质、能量和信息交换的一种方式，特定的饮食和功能食品因子会影响miRNAs的表达。体外癌细胞实验证实，功能食品因子可以调控miRNAs表达，从而发挥抑癌作用。目前，研究较多的功能食品因子主要为多酚类物质，如EGCG、姜黄素和异黄雨等。和体外细胞实验类似，动物实验和人体实验也证实特定的饮食可调控miRNAs表达。人体实验证实，在叶酸缺陷的饮食条件下，miR-222表达显著增强，并且低叶酸吸收水平时人外周血中miRNAs表达水平可反映其营养状况。1.3 食品与表观遗传食品和功能食品因子对生物体和细胞的作用不仅局限于生物表型及miRNAs

5、表达差异，更为重要的是，表观遗传学研究表明，作为遗传与环境重要接口的食品，其对生物体的影响可能会传递至后一代甚至后几代。2miRNAs与电离辐射肿瘤学研究表明，miRNAs功能失调与多种恶性肿瘤密切相关,不同肿瘤对应的miRNAs可发挥致癌基因或抑癌基因的作用。电离辐射是多种肿瘤尤其是白血病和淋巴癌的重要致癌因素，但其致癌机制目前尚不清楚。辐射诱导小鼠胸腺淋巴瘤模型表明，辐射致癌是一个多因素调节的多步骤复杂过程，包括致癌基因Ras、抑癌基因PTEN和抑癌基因p53,基因调控分子miRNAs也发挥重要作用。不仅如此，miRNA的表达也会影响电离辐射敏感性。miR-101的过表达抑制了鼻咽癌细胞增

6、殖，增强了鼻咽癌细胞的放射敏感性，12153/16通过靶向丁11小-18信号增强了非小细胞肺癌细胞的辐射敏感性。另外，miR-30在小鼠血清中以辐射剂量依赖性方式上调，在辐射诱导的凋亡中起关键作用。由此可见，miRNAs在正常细胞和癌细胞的辐射处理过程中发挥重要作用。本课题组前期通过高通量测序技术对4Gy60Co辐射后小鼠组织中差异表达miRNAs进行筛选，结果表明在小鼠胸腺中共发现112个差异表达的miRNAs（45个已知miRNAs及67个新的miRNAs）；同时，在小鼠肝脏中共发现48个差异表达的miRNAs（27个己知miRNAs及21个新的miRNAs）；其中miR-34a显著上调。

7、近年来，miR-34a与辐射的关系备受关注。在正常细胞和癌细胞中，辐射可上调miR-34a并通过调节下游分子机制诱导凋亡。甚至有研究表明，miR-34a可作为机体辐射损伤标志物。因此，miR-34a可能是探索辐射防护作用机制的一个重要调控分子。3电离辐射与miR-34a信号通路沉默信息调节因子（Sird）是已经证实的miR-34a靶基因之一，在生物学过程中发挥重要作用。有研究表明，一氧化碳可以通过抑制miR-34a的表达，从而促进Sirtl的表达来保护肝脏免受缺血、灌注损伤。Sirtl可通过去乙酰化过程调控其下游基因，如肿瘤抑制基因p53oSirtl可使p53第382位赖氨酸残基去乙酰化而抑制

8、p53活化。而p53是核转录因子，在发生DNA损伤、活性氧、癌基因激活与缺氧等遗传毒性应激反应时，其可通过调控下游基因引起细胞周期阻滞，影响DNA修复、诱导细胞调亡。p53可与miR-34a的CPG岛启动子区域发生去甲基化反应，激活miR-34a的表达，从而调控细胞增殖与凋亡。因此，miR-34a、SirtUp53三者形成一个反馈调节回路，参与细胞增殖和凋亡的调控，这对于电离辐射防护调控机制研究非常重要。由于miR-34a/Sirtlp53信号通路与细胞凋亡密切相关，因此凋亡相关蛋白对于研究辐射防护调控机制也非常重要。目前研究比较清楚的执行细胞凋亡的基因家族Bcl-2是由抗凋亡蛋白Bcl-2和

9、促凋亡蛋白BaX组成，构成了细胞死亡通路关键决定调控点。在细胞中，Bax被Bcl-2功能屏蔽。若Bax被活化，将发生一系列的构象变化，使线粒体膜渗透性发生改变,促进细胞色素C等促凋亡分子的分泌。Caspase是凋亡通路的下游相关蛋白，而Caspase-3是CaSPaSe家族中负责降解细胞基质的重要效应器。在应激条件下，线粒体中释放的细胞色素C激活CaSPaSe-3,清除各种细胞基质，导致出现凋亡的形态特征，形成凋亡小体。另外，Bcl-2家族被证实是p53作用的靶点之一,p53可调控抗凋亡蛋白Bcl-2的转录来抑制其功能,p53还可以与促凋亡蛋白Bax的启动子结合，激活线粒体介导的凋亡途径。因此

10、，miR-34aSirtlp53信号通路及凋亡相关蛋白BCI-2、Bax、Caspase-3在细胞增殖与凋亡中发挥重要作用，其对于研究辐射防护作用机制具有重要意义。本课题组在体外研究中发现，60CoY辐射可激活正常肝细胞AM1.-12内miR-34aSirtlp53信号通路，上调miR-34a,下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax和CaSPaSe-3的表达，最终导致细胞发生氧化损伤。采用功能食品因子EGCG预处理，可抑制miR-34aSirtlp53信号通路，下调miR-34a,上调Bcl-2,下调Bax和Caspase-3的表达，进而发挥辐射防护功能。因此，这个信号通路与天然产物的

11、抗辐射机制密切相关。其后，本课题组又从免疫调节作用和抗氧化活性两个方面对EGCG的体内辐射防护作用进行了研究,结果发现电离辐射能够打破机体内氧化还原系统平衡，进而对小鼠正常组织造成严重损伤，采用EGCG灌胃30d可以通过调节小鼠免疫活性及抗氧化活性而有效减轻辐射对小鼠脾脏及肝脏组织的损伤。因此，EGCG是改善电离辐射损伤的一种有效的天然辐射防护剂，多酚类抗氧化剂具有良好的电离辐射防护功能。结语辐射防护功能食品的开发与应用，是保护电离辐射损伤的一条有效新途径。在辐射环境、生物体和食品这三者的相互关系中，miRNAs作为调控分子可能发挥重要作用。生物体处于辐射应激环境其miRNAs表达会发生变化，

12、而摄入功能食品不仅可调控miRNAs表达，而且这种调控可能具有传代作用。miR-34a在电离辐射损伤和防护中发挥重要作用，电离辐射、辐射防护功能食品和miR-34aSirtlp53信号通路密切相关。未来可进一步探究天然产物的作用靶点，并继续对功能食品与环境因素相关的表观遗传学问题进行深入研究。附微小RNA的辐射敏感性和生物标记作用的研究进展摘要：微小RNA（microRNA,简写miRNA）是一类长度为1622个核甘酸的非编码RNA分子。大量证据表明，miRNA通过影响其生物合成、辐射相关信号转导通路、DNA损伤反应等多个环节有效控制肿瘤细胞辐射敏感性，可用于改善癌症放疗效果，并作为辐射暴露的

13、生物标记物。阐述miRNA的辐射敏感性和其生物标记方面的研究进展，为肿瘤治疗和辐射防护提供思路。人类生活的环境中存在多种辐射源，如太阳、宇宙射线等天然辐射源和医疗设备、核能生产中的人造辐射源口。随着核能和核能技术的广泛应用，人类可能暴露于核电站事故等高剂量电离辐射、放射治疗、职业暴露等长期低剂量辐射之中。研究表明，细胞暴露于电离辐射下会引起各种生理反应，包括DNA损伤修复、细胞周期阻滞、细胞凋亡和癌变。微小RNA（microRNA,简写miRNA）作为基因表达的调节因子能够影响多种信号通路，可能改变参与辐射反应的几个细胞过程，引起细胞发生一系列的变化2。因此本文从miRNA的生物合成、肿瘤相关

14、信号通路的调控、DNA损伤反应3个方面阐述miRNA对辐射敏感性的影响，并阐明了miRNA在辐射防护和放疗中的生物标记作用，为肿瘤治疗和辐射防护提供思路。ImiRNA对辐射敏感性的影响放射治疗是癌症治疗的一种重要形式，约有2/3的癌症治疗使用这一方法3。放射治疗利用电离辐射诱导细胞失活并死亡。不同肿瘤及其周围正常组织具有不同的敏感性，提高肿瘤细胞的放射敏感性可以改善放射治疗的疗效，减轻毒性反应。目前越来越多的证据支持miRNA在调节辐射反应的信号转导通路中具有重要作用，因此miRNA调节细胞辐射敏感性已经成为影响放射治疗的潜在途径4。1.lmiRNA的生物合成对辐射敏感性的影响miRNA的生物

15、合成过程中最主要的调节因子是核糖核酸酶DrOSha、DlCER和AGO2。Kraemer等下调正常内皮细胞中的AG02或DICER蛋白，抑制miRNA的表达，发现细胞的辐射敏感性增加。虽然AG02或DICER蛋白的下调与多种miRNA的缺失有关，但Kim等研究发现干扰素调节因子7（IRF7）通过降低AG02的表达，特异性地抑制AG02与抑癌相关miRNA的作用（如Iet-7、miR-15、miR-30、miR-34、miR-193和miR-708）,诱导胶质瘤细胞的放疗抵抗。1.iU等敲除小鼠成纤维细胞中的DICER,降低let-7的生物发生、导致G1/S期过渡延长，增强细胞的辐射敏感性。但是

16、Surova等发现，虽然在耐辐射肺癌细胞系中，DroSha和DlCER表达水平较高，但下调DICER或DrOSha对细胞的辐射敏感性没有影响，调节miRNA的生物发生机制没有提高肺肿瘤的辐射敏感性。提示不同的细胞类型对放射治疗的敏感性显著不同，并且在正常细胞和肿瘤细胞中影响辐射敏感性的机制可能不同。1.2miRNA调控肿瘤相关信号通路对辐射敏感性的影响目前己经有研究证实有3条主要的促生存信号通路与放射治疗相关，包括PI3K/AKT通路、MAPK通路和NF-KB通路9-10。这些信号通路可以通过影响细胞凋亡和DNA损伤修第过程，对肿瘤的辐射敏感性产生巨大影响。PTEN是一种抑癌基因，在调控肿瘤细胞生长、代谢等过程中发挥重要作用。PTEN负向调控PI3K活性，璘酸化AKT,激活下游多种凋亡相关蛋白，抑制细胞凋亡10。Zhou等11使用逆转录病毒转导法和反义寡核甘酸转染法分别促进和抑制肿瘤细胞中miR-21的